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沙棘对阿尔茨海默病模型大鼠影响
沙棘对阿尔茨海默病模型大鼠影响
【摘要】 目的探讨沙棘对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力及脑组织SOD(superoxide dismutase,SOD)活性及MDA(malondialdehyde,MDA)含量的影响,为沙棘的开发及临床应用提供科学的理论依据。方法D-半乳糖腹腔注射9周,建立Wistar大鼠亚急性衰老模型后,第4周,Aβ25-35注入大鼠大脑海马内,建立阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)模型。成模后第2周开始用沙棘及脑复康治疗8周。行为学采用Morris 水迷宫方法检测大鼠学习和记忆能力;取脑组织测定超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量。结果行为学检测结果显示,模型组大鼠学习和记忆能力明显下降(Plt;0.05),药物组学习和记忆能力可见有明显提高(Plt;0.05);药物组与模型组相比,脑组织SOD活性明显增强(Plt;0.05),MDA含量明显降低(Plt;0.01)。结论沙棘能改善阿尔茨海默病大鼠学习记忆的能力,降低氧自由基对机体的损伤。
【关键词】 阿尔茨海默病; 沙棘; 学习记忆能力; 超氧化物歧化酶; 丙二醛
沙棘又名醋柳、酸刺子,为胡颓子科植物沙棘属Hippophae rhamnoides L.,其化学成分主要有黄酮类、萜类、甾体类、维生素类、蛋白质和氨基酸类、挥发油和脂肪酸类、有机酸类、糖及微量元素等,是一种营养丰富,药用价值极高的植物。沙棘对心、脑血管系统疾病及消化系统疾病具有显著的作用,对肝脏具有保护作用,还可以清除人体内的自由基和抗衰老[1,2]。本实验在D-半乳糖亚急性衰老模型基础上建立Aβ25-35脑内注射AD复合模型,探讨沙棘对AD大鼠的作用,为沙棘的开发及临床应用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 药物沙棘为市售品,取500 g生药材加入4 000 ml(8倍量)60%乙醇,放置1 h,在60℃水浴回流2 h,残渣加入3 000 ml(6倍量)60%乙醇水浴回流2 h,合并滤液,用旋转蒸发仪回收溶剂,得粗粉59 g(每克粗粉相当于生药材8.5 g)。D-半乳糖,β-淀粉样蛋白(Aβ25-35 ),威海亚太药业有限公司产品,SOD试剂盒与MDA试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
1.2 动物及分组Wistar大鼠,雌雄各半,体重为(220±20)g,由延边大学医学部实验动物科提供。实验分组为:正常组正常常规饲养9周;Aβ25-35模型组以D-半乳糖〔50 mg/(kg·d)〕腹腔注射9周,并在第4周时以Aβ25-35(1 μg/μl)脑内海马定点注射4 μl;药物对照组成模后第2周开始脑复康(0.5 ml/d)灌胃8周;药物组成模后第2周开始以沙棘水提物(1.0 ml/d)灌胃8周。各组均在第4周时以Aβ25-35(1 μg/μl)脑内海马定点注射4 μl。
1.3 指标检测
1.3.1 大鼠记忆能力的检测指标各组大鼠给药9周后进行Morris水迷宫测试。连续6 d记录大鼠的逃避潜伏期,取其平均值作为大鼠学习能力的检测指标。实验第7天去除站台,记录大鼠的穿台次数即每只大鼠从同一位点入水后,60 s内游经站台的次数,以此作为大鼠记忆能力的检测指标。
1.3.2 SOD活性和MDA含量的测定取脑组织按SOD测定试剂盒说明书进行,用可见光分光光度计测其OD值,计算SOD活性。MDA测定采用TBA法测得OD值,计算MDA含量。
1.3.3 统计学处理实验结果用SPSS10.0统计学软件进行处理。结果数据以±s表示,采用单因素方差分析进行显著性差异比较。
2 结果
2.1 沙棘对阿尔海默病大鼠逃避潜伏期的影响模型组与药物组比较,大鼠逃避潜伏期有显著性差异(Plt;0.05);药物对照组与模型组比较大鼠的逃避潜伏期有显著性差异(Plt;0.01)。结果见表1。表1 沙棘对阿尔茨海默病大鼠逃避潜伏期的影响(略)
2.2 沙棘对阿尔茨海默病大鼠穿台次数的影响药物组与模型组比较穿台次数明显增多,有显著性差异(Plt;0.05);药物对照组与模型组比较有显著性差异(Plt;0.05)。结果见表2。表2 沙棘对阿尔茨海默病大鼠穿台次数的影响(略)
2.3 沙棘对阿尔茨海默病大鼠脑组织SOD活性的影响药物组的SOD活性与模型组比较有显著性差异(Plt;0.05);药物对照组与模型组比较有显著性差异(Plt;0.01)。结果见表3。表3 沙棘对阿尔茨海默病大鼠脑组织SOD活性的影响(略)
2.4 沙棘对阿尔茨海默病大鼠脑组织MDA含量的影响药物组脑组织MDA含量与模型组比较有显著性差异(Plt;0.05);药物对照组与模型组比较有显著差异(Plt;0.01)。结果见表4。表4 沙棘对阿尔茨海默病大鼠脑组织MDA含量的影响(略)
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