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清热解毒软胶囊抑菌抗炎作用实验探究
清热解毒软胶囊抑菌抗炎作用实验探究
【摘要】 目的研究清热解毒软胶囊的抑菌、抗炎作用。方法呼吸道常见致病菌用肉汤稀释法测定清热解毒软胶囊最低抑菌浓度(MIC);用蛋清诱发大鼠足肿胀、二甲苯诱发小鼠耳肿胀等急性炎症模型和大鼠棉球肉芽肿慢性炎症模型研究抗炎作用。结果清热解毒软胶囊具有体外抗菌作用,对引起呼吸道感染的9种常见病原菌和致病菌均有不同程度的抑制作用;清热解毒软胶囊具有抗炎作用,对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、大鼠蛋清性足肿胀及大鼠棉球肉芽肿均有不同程度的抑制作用。结论本研究结果提示清热解毒软胶囊具有抑菌、抗炎作用,为清热解毒软胶囊临床用于治疗流感、上呼吸道感染、咽喉肿痛等症提供了实验参考依据。
【关键词】 清热解毒软胶囊 抑菌 抗炎
中药复方制剂清热解毒软胶囊由石膏、金银花、玄参、地黄、连翘、栀子、甜地丁、黄芩、龙胆、板蓝根、知母、麦冬等组成,具有清热解毒功效,临床上主要应用于咽喉肿痛,感冒发热,上呼吸道感染等病,该方多年应用于临床,疗效明显。为了进一步为临床提供安全有效的实验依据,对清热解毒软胶囊的抑菌、抗炎作用进行了实验研究。
1 材料
1. 1 药物 清热解毒软胶囊, 石家庄欧意药业有限公司,批;利咽灵片,吉林省天兴堂药业有限公司,批号;阿司匹林(桂林南药股份有限公司提供,批号:070201);二甲苯和醋酸均为北京长海化工厂产品,分析纯。
1. 2 动物 NIH系小鼠,合格证号:2007A004,质量18~22 g;SD系大鼠,合格证号: 2007A003,质量180~220 g,均由广东省医学实验动物中心提供。
1.3 细菌 试验所用细菌菌种均来自北京卫生部生物制品研究所。包括金黄色葡萄球菌(26112-5)、乙型溶血性链球菌(32210)、肺炎球菌(31001)、甲型溶血性链球菌(322090 、卡他(38101)、白喉杆菌(38101)、大肠杆菌(44113-5)、绿脓杆菌(10211)、白色念珠菌(98001)。
2 方法与结果
2.1 体外抑菌作用[1,2]本实验菌种选用9种有代表性的,主要是呼吸道和消化道感染的常见病原菌和条件致病菌,用肉膏汤将清热解毒软胶囊和利咽灵片配制成每毫升含生药量0.20,0.05,0.025 g……共10个药物浓度,每管总量1 ml,流通蒸气灭菌。对链球菌的试验尚需在灭菌药液中添加1%葡萄糖, 对肺炎球菌和白喉杆菌则另加10%兔血清,对白色念珠菌的试验应用沙氏培养液稀释药液。空白对照为不含药物的培养基。每排药液的各个浓度管及空白对照管分别加入1∶2 000的试验菌液(8 h培养物)0.1 ml,37℃培养18 h观察结果。对白色念珠菌的实验则用24 h培养物,药液加菌液后培养36 h观察结果。判定最小抑菌浓度(MIC),MIC是指完全抑制试验菌种生长所含的最小药物浓度。结果见表1。实验结果表明,清热解毒软胶囊对所试菌种,包括引起呼吸道和消化道感染的常见致病菌和条件致病菌均有很强的抗菌作用,对各菌的最小抑菌浓度(MIC)介于3.05×10-6~4.77×10-8 g/ml之间,其中对白色念珠菌没有抑制作用。
表1 清热解毒软胶囊的抑菌作用(略)
2. 2 抗炎作用[3~5]
2.2.1 对蛋清所致大鼠足肿胀的影响SD大鼠60只,雌雄各半,体重为150~180 g,随机分为空白组,阿司匹林组,利咽灵片组,清热解毒软胶囊低、中、高剂量组。每组10只。给药1次/d,连续3 d。各组灌胃给药(10 ml/kg体重),空白对照组给予等体积生理盐水。实验前每鼠左后足踝关节处用记号笔作一清晰横线,排水法测鼠足正常体积。末次给药1 h后每鼠左后足跖皮下注射100%鲜鸡蛋清0.05 ml,分别于注射鲜鸡蛋清后1,2,3,4 h各测鼠足体积1次,计算鼠爪肿胀抑制百分率,结果见表2。实验结果表明,清热解毒软胶囊高剂组可显著抑制1,2,3,4 h的足肿胀率(Plt;0.05或Plt;0.01);低、中剂组可显著抑制4 h的足肿胀率(Plt;0.01)。
鼠爪肿胀抑制百分率(%)= 致炎后鼠爪体积-致炎前鼠爪体积致炎前鼠爪体积×100%
表2 清热解毒软胶囊对大鼠蛋清性足肿胀的影响(略)
与空白组比较,*P<0.05,**P<0.01;n=10
2.2.2 二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响NIH小鼠60只,体重20~24 g,雌雄各半,随机分为空白组,阿司匹林组,清热解毒软胶囊低、中、高剂量组,利咽灵片组,每组10只。然后给药,1次/d,连续3 d。各组灌胃给药(20 ml/kg体重),空白对照组给与等体积生理盐水。末次给药1 h后将二甲苯50 μl均匀滴于小鼠右耳两面,左耳不涂作为对照。1.5 h后将小鼠脱颈椎处
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