蚤休皂苷对氧化损伤脐静脉内皮细胞内钙离子变化影响.docVIP

蚤休皂苷对氧化损伤脐静脉内皮细胞内钙离子变化影响 　作者：高琳琳，李福荣，康莉，司艳红，王浩 【摘要】 　　目的利用激光共聚焦显微镜研究蚤休皂苷（Pa）对H2O2诱导的脐静脉内皮细胞（ECV304细胞）损伤的钙离子（Ca2+）的变化及其机制。方法体外培养ECV304细胞，建立氧化损伤的细胞模型，然后分为5个实验处理组：①正常对照组；②氧化损伤组；③高浓度蚤休皂苷（1 μg/ml）组 ；④中浓度蚤休皂苷（100 pg/ml）组；⑤低浓度蚤休皂苷（10 pg/ml）组；应用激光共聚焦显微镜观察其细胞凋亡的形态学差异。并利用激光共聚焦显微镜观察、图像分析仪分析各实验分组细胞中游离Ca2+的表达、激光共聚焦显微镜描记预处理前后Ca2+的动态表达。结果损伤组细胞内游离Ca2+浓度明显高于正常组(Plt;0.01)，而各蚤休皂苷预处理组均使Ca2+荧光强度下降，显著低于损伤组(Plt;0.01)，并呈剂量依赖性效应。H2O2损伤剂量的刺激下，ECV304胞浆内的游离Ca2+呈现双相变化：由静息状态持续增加到峰值，ΔF为37.22±3.72，平台期与静息状态荧光值的变化ΔP为7.65±0.69，加入蚤休皂苷预处理10 min后，再加入100 μmol/L的H2O2 ，ΔF和ΔP均明显下降(Plt;0.01)。结论蚤休皂苷可以保护H2O2造成的ECV304细胞的氧化损伤，与抑制了钙离子介导的凋亡通