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超声波提取鱼腥草多糖工艺探究
超声波提取鱼腥草多糖工艺探究
【摘要】 目的建立超声波提取鱼腥草多糖的最佳工艺。方法以多糖得率、多糖含量为指标成分,采用正交实验对鱼腥草多糖的超声提取工艺进行优选。结果最佳工艺为:鱼腥草料液比1∶30,超声60 min,醇沉浓度为90%。多糖得率及含量分别为14.61%,12.22%。结论该方法简便,准确,灵敏度高,适合于鱼腥草多糖的提取。
【关键词】 鱼腥草 多糖 超声提取 正交实验
Abstract:ObjectiveTo establish the optimum preparative procedure for ultrasonic extracting polysaccharide from Houttuyniacordata.MethodsThe optimum conditions of extraction process for polysaccharide from Houttuynia cordata were selected with the yield and polysaccharides content as marks by orthogonal experimental design .ResultsThe optimum preparative procedure was asfollows: Houttuynia cordata was extracted with ultrasonic technology at solid -liquid ration of 1:30, 60min and precipitated with 90% ethanol.The polysaccharides yield and content were 14.61% and 12.22%, respectively.ConclusionThe optimum preparative procedure is simple, quickly and highly efficient.
Key words:Houttuynia cordata; Polysaccharide ; Ultrasonic extracting; Orthogonal experimental design
鱼腥草为三白草科Saururaceae 蕺菜属植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的新鲜全草和干燥地上部分[1],具有清热解毒、消肿排脓、利尿通淋的功效。主要用于肺脓疡、痰热咳嗽、热痢热淋、痈疮肿毒[2]。本课题组曾对鲜鱼腥草GC -MS、HPLC -MS指纹图谱、黄酮类、酚类化合物的化学研究方面进行报道[3 ~6]。药理研究发现鱼腥草水溶性多糖对羟自由基和超氧自由基有较明显的清除作用[7]。但有关鱼腥草多糖的提取、工艺研究尚未见报道。超声波作为一种高效提取方法已经广泛地应用于各类化学成分的提取,为此我们对超声提取鱼腥草多糖工艺进行考察,采用正交实验法以多糖含量、得率为指标进行最佳工艺优选,以期找出合理可行的制备工艺。
1 仪器与试药
1.1 仪器电子天平(AY120,SHAMAOZU CORPOPAITION JAPAN)、HH -6 -恒温水浴锅(江苏金坛市宏华仪器厂)、超声波清洗器(250W,上海之信仪器有限公司)、电热鼓风恒温干燥箱(3100W,上海讯能电热设备有限公司)、UV -1800 紫外可见分光光度计(北京瑞利分析仪器公司);双B 循环水式多用真空泵(SHB -IV,郑州长城科工贸有限公司)。
1.2 试药葡萄糖标准品Sigma 公司产品;苯酚,硫酸、丙酮、乙醚、三氯乙酸、氢氧化钠试剂均为分析纯,医用乙醇(广州市新升华玻有限公司),苯酚试液参照文献[8]配制。
鱼腥草购于广州清平市场,经广东药学院陈幼竹博士鉴定为三白草科蕺菜属植物Houttuynia cordata Thunb.
2 方法与结果
2.1 鱼腥草多糖的提取与精制取鱼腥草干品200 g,以95%乙醇回流脱脂3 次,药渣置通风处晾干,加水10 倍量、8 倍量、8倍量,于90 ~100℃依次提取3,2,1 h,过滤,合并滤液,浓缩至约200 ml,加入等体积30%三氯乙酸溶液脱蛋白,4℃静置,离心,上清液用0.01 mol/L 的氢氧化钠调pH =7,溶液减压浓缩,浓缩液对水透析,透析液减压浓缩至100 ml,加入95%乙醇调含醇量为80%,静置,离心,沉淀用无水乙醇、丙酮、无水乙醚依次洗涤,真空干燥,得除蛋白精制鱼腥草多糖。
2.2 多糖含量测定方法的建立
2.2.1 标准品溶液的制备精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖0.096 4 g,加水溶解并定容至100 ml,
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