重组人干扰素γ对球后成纤维细胞CD40 mRNA表达影响.docVIP

重组人干扰素γ对球后成纤维细胞CD40 mRNA表达影响 　【关键词】 成纤维细胞；,甲状腺相关眼病；,干扰素,重组；,抗原,CD40；,细胞,培养的 　　摘要: 目的 探讨在重组人干扰素γ（rhIFNγ）作用下，正常人和甲状腺相关眼病（TAO）患者球后成纤维细胞（RF）CD40 mRNA的表达情况。方法 用RTPCR法，对不同浓度rhIFNγ及400 U/mL rhIFNγ作用不同时间诱导体外培养的正常人和TAO患者RF CD40 mRNA进行半定量分析。结果 经100，200，400，1000 U/mL rhIFNγ作用48 h后，正常人和TAO患者RF CD40的光密度比值与各自对照组比较，差别有统计学意义（P＜0.01）；两者同一浓度比较差别无统计学意义（P＞0.05）。经400 U/mL rhIFNγ作用12，24，48，72 h后，正常人和TAO患者RF CD40的光密度比值与各自对照组比较差别有统计学意义（P＜0.05），两者同一时间比较差别无统计学意义（P＞0.05）。结论 正常人和TAO患者RF均表达CD40 mRNA。rhIFNγ可上调正常人和TAO患者RF CD40 mRNA的水平，呈浓度和时间依赖。 　　关键词: 成纤维细胞； 甲状腺相关眼病； 干扰素，重组； 抗原，CD40； 细胞，培养的 　　ABSTRACT: Objective To quantify the mRNA expression of CD40 induced by recombinant human interferon gamma(rhIFNγ) in cultured human retroocular fibroblast(RF) from normal subjects and thyriod associated ophthalmophy(TAO) patients. Methods Half quantifying the mRNA expression of CD40 induced by different concentration and time rhIFNγ in cultured human RF from normal subjects and TAO patients. Results The absorbency values of 100, 200, 400, 1000 U/mL rhIFNγ in RF from normal subjects and TAO patients were increased significantly than negative control and 50 U/mL rhIFNγ group(Plt;0.01). Both not difference in same concentration. The absorbency values of 12,24,48,72 h of 400 U/mL rhIFNγ in RF from normal subjects and TAO patients， showed significantly different compared with negative control group(Plt;0.01)，and no difference in same time. Conclusions The cultured human RF from normal subjects and patients with TAO all express CD40 mRNA. The rhIFNγ could upregulate CD40 gene mRNA expression with dosedependence and timedependent in both human RF. 　　KEY WORDS: fibroblasts; Graves’ disease; 　　甲状腺相关眼病(thyroid associated ophthalmopathy，TAO)在病理组织学特征性表现为眼眶组织内大量亲水性糖胺聚糖(glycosaminoglycan，GAG)聚集和免疫活性细胞浸润[1]。免疫活性细胞产生的炎症介质能上调球后成纤维细胞（retroocular fibroblast，RF）的目的基因，进而改变其生物合成活性，引起TAO的发生、发展，但免疫活性细胞浸润眼眶、免疫活性细胞和RF相互作用最终激活RF的分子机制尚不明确。RF与球后浸润的免疫活性细胞能否通过CD40/CD40L共刺激通路而相互作用，取决于RF是否表达CD40及球后局部微环境对CD40表达的影响；同时组织学证实TAO患者球后组织存在细胞因子γ(in