黄柏中盐酸小檗碱在不同复方中提取率考察.docVIP

黄柏中盐酸小檗碱在不同复方中提取率考察 　【摘要】 　　目的考察黄柏中的盐酸小檗碱在不同复方中的提取率。方法按照部颁标准各品种项下的制备工艺进行提取，高效液相色谱（HPLC）法测定黄柏中盐酸小檗碱的含量。结果黄柏中的盐酸小檗碱在不同复方中提取率不同，在所考察的6个复方中提取率分别为：17.13%，12.51%，7.91%，8.56%，12.61%，23.06%。结论黄柏中盐酸小檗碱在不同复方中的提取率均偏低，有必要对其工艺进一步改革，优化工艺参数，提高药品质量。 【关键词】 黄柏 盐酸小檗碱 提取率 　　黄柏为常用中药之一，具有清热燥湿、泻火解毒的功效，在以清热作用为主的复方制剂中应用较多。黄柏树皮中含有多种生物碱，主要为小檗碱，其次为巴马亭、木兰花碱、黄柏碱、药根碱、康迪辛碱等。另含苦味质黄柏酮、黄柏内酯、白藓内酯、β及γ-谷甾醇、7-去氢豆甾醇、脂肪油及黏液质等。在以黄柏为主药的复方中，目前多以盐酸小檗碱的含量作为质控指标。但笔者在研究过程中发现，黄柏中的盐酸小檗碱在不同复方中的提取率有较大差异，考虑到可能是复方配伍后对小檗碱溶出率的影响所致。为了验证这一假设，选择《部颁标准》收载品种中以黄柏为主要药味，且提取工艺均为水提的6个复方，对其盐酸小檗碱的提取率进行了考察，为今后《部颁标准》收载品种进行工艺改进、提高药品质量提供参考依据。 　　1 仪器与试剂 　　1.1 仪器 　　Waters 600E高效液相色谱仪，Waters 600泵，Waters 2487紫外检测器，Millennium32色谱工作站。 　　1.2 试剂甲醇、乙腈均为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为双蒸水。所用药材购于陕西省咸阳市药材公司。 　　2 方法 　　2.1 黄柏药材的含量测定取黄柏药材3份，每份0.1 g，精密称定，置100 ml量瓶中，分别精密加入乙腈-0.1% 磷酸溶液（50∶50）（每100 ml加入十二烷基磺酸钠0.1 g）80 ml，超声提取40 min，放冷，用乙腈-0.1%磷酸溶液（50∶50）稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。按《中国药典》2005年版一部黄柏项下的含量测定方法，精密吸取对照品溶液、黄柏药材溶液10 μl，注入液相色谱仪中，测定，结果盐酸小檗碱含量分别为59.8，61.3，61.9 mg/g,平均含量为61.0 mg/g。 　　2.2 黄柏药材水提液中盐酸小檗碱的含量称取黄柏药材30 g，粉碎成粗粉，加10倍量水煎煮3次，2 h/次，提取液趁热过滤，滤液浓缩至200 ml，备用。 　　按文献方法［1］，精密吸取对照品溶液5 μl，供试品溶液10～15 μl，注入液相色谱仪中，测定，计算盐酸小檗碱的含量及提取率。结果见表1。结果表明，黄柏水提工艺中盐酸小檗碱的提取率为8.29％。表1 黄柏水提液中盐酸小檗碱的提取率提取次数盐酸小檗碱含量C/mg·ml-1提取率（略） 　　2.3 不同复方中盐酸小檗碱的提取率 　　2.3.1 盐酸小檗碱含量测定方法的建立色谱条件：色谱柱为十八烷基硅胶键合相；检测波长265 nm；流动相为乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液（用磷酸调pH值至3.0）（30 ∶70）；柱温为常温； 流速1 ml/min。 　　供试品的制备：精密吸取提取液3ml，加甲醇定容至50ml，滤过，取续滤液，即得。 　　对照品的制备：精密称取盐酸小檗碱2.1mg，加甲醇定容至100 ml，制成0.021 mg/ml的对照品溶液。 　　线性关系的考察：精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液(0.068 mg·ml- 1 )，分别进样2.5，5，7.5，10，12.5，15 μl，以进样量(μg) 为横坐标(X)，峰面积为纵坐标( Y) ,绘制标准曲线，计算得回归方程为:Y= 4 578.22X - 28.86，r = 0.999 9。 　　　仪器精密度实验：精密吸取供试品溶液,重复进样5 次,10μl/次,记录盐酸小檗碱的峰面积，平均峰面积为631 903，RSD为1.20％，表明本方法精密度良好。　　稳定性实验：于供试溶液配制后0，1，2，4，8 h ，分别精密吸取10 μl 注入HPLC 仪，测定盐酸小檗碱峰面积，结果平均峰面积为636 069，RSD为0.21％，表明样品溶液在8 h 内稳定。 　　重复性实验：精密称取黄柏药材样品5 份，每份约15 g ,按“2.2”项下方法及“2.3”项色谱条件进行盐酸小檗碱的含量测定,结果平均含量为0.283 mg/g，RSD为1.85％，表明本方法重复性良好。 　　2.3.2 6个复方样品的制备为了考察黄柏中盐酸小檗碱在不同复方中的提取率，选择部颁标准中收载的以黄柏为主要药味的6个复方，按照部颁标准中所载的制备方法进行样品制备。 　　祛瘀益胃胶囊的