免疫球蛋白E及白细胞介素5在鼻息肉中表达临床意义.docVIP

免疫球蛋白E及白细胞介素5在鼻息肉中表达临床意义 　【摘要】 探讨鼻息肉组织中免疫球蛋白E（IgE）和白细胞介素5（IL-5）的表达对嗜酸粒细胞（EOS）浸润聚集的作用及IgE、IL-5和与鼻息肉形成的关系及其意义。方法 应用连续两步免疫酶法（Sandwich法）检测31例鼻息肉标本（鼻息肉组）和11例下鼻甲黏膜标本（对照组）组织匀浆中IgE水平；应用酶联免疫吸附测定法检测组织匀浆中IL-5水平,同时观测组织中EOS的浸润程度。结果 鼻息肉组IgE和IL-5水平均明显高于对照组（圴P＜0.01）,且IgE、IL-5水平分别与鼻息肉组织中EOS浸润数呈正相关（P＜0.01）。结论 IgE水平的上调提示鼻息肉中存在局部变态反应，其对鼻息肉中IL-5的上调和EOS的浸润聚集具有重要作用。 【关键词】 鼻息肉 免疫球蛋白E 白细胞介素5 嗜酸粒细胞 鼻息肉是耳鼻咽喉科的常见病,患病率约占成年人的1%～2%,术后复发率约为10%～20%［1］，是一种由多种因素所致的鼻黏膜慢性炎性病变，发生机制尚未十分清楚。其最常见的组织学特点是以嗜酸粒细胞（EOS）为主的炎性细胞浸润和组织水肿。本研究通过检测鼻息肉组织中免疫球蛋白E（IgE）和白细胞介素5（IL-5）水平，同时观察EOS浸润的程度，探讨IgE和IL-5在鼻息肉中EOS浸润聚集机制的作用。 1 资料与方法 1.1 标本来源及制备 31例鼻息肉标本来自2006年1月～2007年12月在我院行鼻息肉手术的患者（鼻息肉组）,男17例,女14例；年龄12.9～66.2岁,平均43.6岁。所有患者均无变应性疾病史及近期内未服用类固醇激素、抗组胺药及抗生素药物，无阿司匹林耐受不良。25例对照组标本来自因鼻中隔偏曲并下鼻甲肥大而行部分下鼻甲切除患者的下鼻甲黏膜（无全身疾病史,无变态反应史,无慢性鼻窦炎病史）,年龄18.2～65.9岁,平均39.4岁。鼻息肉和下鼻甲黏膜标本分为两份,一份用4%多聚甲醛固定后石蜡包埋，行常规病理检查；另一份用生理盐水洗净血迹,置-20 ℃低温保存。 1.2 检测方法 将标本室温融化,称重后剪碎,每100 mg组织加生理盐水1 ml,在冰浴中用BY89-1电动玻璃匀浆器（宁波新芝科技器材研究所）将组织细胞碾碎,用低温离心机（德国）于4 ℃、以5000 r/min，离心10 min，取上清液备用。 1.2.1 IgE测定 使用美国Beckman公司Accessimmoassay system,应用连续两步免疫酶法（Sandwich法）检测标本组织中IgE水平。 1.2.2 IL-5测定 应用酶联免疫吸附测定法（ELISA法）。试剂盒购自美国TPI Inc公司,按照试剂盒说明书进行操作,设零孔及阴性对照孔。用法国Pasteur LP400酶标仪测各孔450 nm吸光度（A）值。酶标仪根据标准品浓度及Ａ值,自动得出标准曲线,由标本的A值分别在相应的标准曲线上推算出各个组织标本中IL-5水平（ng/L）。 1.2.3 组织学观察 鼻息肉及下鼻甲黏膜的石蜡包埋标本，切片,苏木精-伊红常规染色。使用NIKONE600型显微镜（日本）行双盲法检测,每个标本随机选取2张切片,从中随机观察10个高倍视野（×400）,手工计数鼻息肉组织和下鼻甲黏膜下、血管周围的EOS数,其平均值为该标本EOS浸润数。 1.3 统计学方法 用SPSS 10.0 for Window软件包进行统计学处理。用t检验分析比较两组组织中IgE、IL-5水平和的EOS浸润程度；用相关分析比较IgE、IL-5水平与EOS浸润程度的相关性,以P＜0.05为差异有统计学意义。 2 结果 鼻息肉组黏膜下可见不同程度的EOS浸润，主要分布在黏膜上皮下或小血管周围，该细胞胞质丰富，色泽鲜艳，颗粒饱满，具有2～3个分叶核，水肿型息肉中EOS浸润较多；对照组黏膜下EOS浸润明显少于鼻息肉组。两组IgE、IL-5与EOS检测结果见表1。鼻息肉组IgE、IL-5水平分别与EOS浸润数呈正相关（P＜0.01）。表1 鼻息肉组和对照组IgE、IL-5及EOS水平的比较 注：与对照组比较，*P＜0.01 3 讨论 鼻息肉是一种常见病，既往多认为鼻息肉的发生与慢性炎症和变态反应有关。近年来随着免疫学和分子生物学的进展,国内外学者认为鼻息肉的发病机制是多因素、多步骤的过程，并发现多种细胞因子在鼻息肉中存在并影响其发生及病理变化［2］。 　 大多数鼻息肉中存在着明显的EOS浸润。这些浸润的EOS胞质颗粒中含有血管活性物质（vasoactive sutstances）、嗜酸粒细胞阳离子蛋白（eOS inophilcationic protein,ECP）、主要碱性蛋白（major basic protein,MBP）、趋化因子（