全脑缺血-再灌注对海马CA1区GAD65表达影响及意义.docVIP

全脑缺血-再灌注对海马CA1区GAD65表达影响及意义 　 作者：许林峰，马文裴，刘静，冯忠堂 【摘要】 目的 探讨全脑缺血-再灌注对成年大鼠海马CA1区GAD65表达的影响及意义。方法 成年雄性SD大鼠24 只，随机分为3组：假手术组（SH）、缺血-再灌注3天组 （IR-3） 及缺血-再灌注7天组（IR-7），每组8只。采用四动脉阻断法制作全脑缺血-再灌注模型，应用免疫组织化学方法检测海马CA1区谷氨酸脱羧酶（glutamic acid decarboxylase，GAD）同工酶GAD65的表达变化。结果 与假手术组相比，IR-3组GAD65的表达明显增多，IR-7组恢复正常。结论 GABA能中间神经元对缺血相对耐受；全脑缺血-再灌注3天，GAD65的表达增多可能是一种代偿性的机制，以减轻脑缺血后的高兴奋性。 【关键词】 脑缺血；再灌注；谷氨酸脱羧酶；海马；大鼠 ［Abstract］ Objective To observe the effect of cerebral ischemia-reperfusion on the expression of GAD65 in the hippocampal CA1 region of adult rats.Methods 24 male SD rats were randomly divided into three groups:sham operation group （SH，n=8），ischemia-reperfusion 3 days （IR-3，n=8） and 7 days group （IR-7，n=8）。cerebral ischemic episode was achieved by 4-artery occlusion．Immunohistochemical method was applied to observe the expression of GAD65 in hippocampal CA1 region.Results At IR-3，the immunoreactivities of the GAD65 were markedly elevated in the CA1 region，compared with SH group.At IR-7，their immunoreactivities recovered at the mal level.Conclusion GABA interneurons relatively resist ischemia-reperfusion injury，and the increasing expression of GAD65 in 3 d after ischemia-reperfusion can be a compensatory mechanism to reduce the hyperexcitability associated with ischemia-reperfusion. ［Key words］ brain ischemia; reperfusion; glutamate decarboxylase; hippocampus; rat γ-氨基丁酸（γ- Aminobutyric Acid，GABA）是哺乳类动物中枢神经系统中最重要的一种抑制性氨基酸（inhibitory amino acid，IAA）递质［1］，GABA能的抑制作用在调控谷氨酸能突触的活动中起着重要的作用。因此，GABA能系统的异常可以导致神经元的高兴奋性，从而导致再灌注损伤。因而研究脑缺血后GABA功能的变化，对脑缺血的治疗有重要的指导意义。本研究通过建立全脑缺血-再灌注动物模型，探讨成年大鼠海马CA1区GAD65的表达变化及意义。 1 材料与方法 11 实验动物及分组 24只雄性SD大鼠，体重200~250g（昆明医学院实验动物中心提供），随机分为3组：假手术组（SH）、缺血再灌注3天组（IR-3） 和缺血再灌注7天组（IR-7）各8只。 12 全脑缺血-再灌注模型制备 采用四血管阻断法制作全脑缺血（10 min）-再灌注动物模型。以04%戊巴比妥钠（40 mg／kg）腹腔注射麻醉后，从后颈部正中纵向切开皮肤，分离椎旁肌，暴露第一颈椎翼状孔，电灼烧凝固双侧椎动脉，造成永久性关闭。再从颈前正中纵向切开皮肤，分离双侧颈总动脉，分别用丝线绕过双侧颈总动脉，将丝线的另一端置于皮肤切口外，不完全缝合皮肤切口以备次日用。24 h后用留置丝线将双侧颈总动脉由皮肤切口牵出，用动脉夹夹闭双侧颈总动脉10 min后再通。术中及术后保持肛温37 ℃。模型成功标准：1 min内昏迷，双侧瞳孔放大，翻正反射消失。