气相色谱分析-中.ppt

当k＞10时，随容量因子增大，分离度的增长是微乎其微的。一般取k为2-10最宜。 对于GC，通过提高温度，可选择合适的k值，以改进分离度。 而对于LC，只要改变流动相的组成，就能有效地控制k值。它对LC的分离能起到立竿见影的效果 对于宽沸程的多组分混合物，可采用程序升温法，即在分析过程中按一定速度提高柱温。 程序升温好处： 改善分离效果 缩短分析周期 改善峰形 提高检测灵敏度 流速与柱效的关系 柱温是一个重要的操作参数，直接影响分离效能和分析速度。 一般原则是：在使最难分离的组分有尽可能好的分离前提下，采取适当低的柱温，但以保留时间适宜，峰形不拖尾为度。 柱温的选择还应考虑固定液的使用温度，柱温不能高于固定液的最高使用温度，否则固定液挥发流失，对分离不利。 3. 柱温的选择 在程序开始时，柱温较低，低沸点的组分得到分离，中等沸点的组分移动很慢，高沸点的组分还停留于柱口附近；随着温度上升，组分由低沸点到高沸点依次分离出来。 采用程序升温后不仅改善分离，而且可以缩短分析时间，得到的峰形也很理想。 * 气相色谱分析理论基础 色谱理论需要解决的问题： 色谱分离过程的热力学和动力学问题。 试样在色谱柱中的分离需要解决两个问题： 1. 试样各组分在两相间的分配-反映在各个色谱峰在柱后出现 的时间（保留值）上。 （热力学因素控制，包括组分和固定液的结构和性质） 2. 各组分在色谱柱中的运动情况-反映在半峰宽度上。 （动力学因素控制，包括两相中的运动阻力，扩散） 两种色谱理论： 塔板理论和速率理论。 二、色谱分离的基本理论 塔板理论的假设： (1)在每一个平衡过程间隔内，平衡可以迅速达 到，达到分配平衡的每一小段柱长为理论塔板高度（H）； (2) 将载气看作成脉动（间歇）过程； (3) 样品和载气均加在第0号塔板上，且试样沿色谱柱方向的扩散可忽略； (4) 每次分配的分配系数相同。 半经验理论 将色谱分离过程比拟作蒸馏过程，将连续的色谱分离过程分割成多次的平衡过程的重复 （类似于蒸馏塔塔板上的平衡过程） 塔板理论 ——柱分离效能指标 色谱柱长：L 虚拟的塔板间距离：H 色谱柱的理论塔板数：n 色谱峰越窄，塔板数越多，理论塔板高度越小， 柱效能越高 描述柱效能的指标 理论塔板数与色谱参数之间的关系为： 用不同物质计算可得到不同的理论塔板数。 三者的关系为： n = L / H 组分在tM时间内不参与柱内分配。需引入有效塔板数和有效塔板高度： 有效塔板数和有效塔板高度 (1)当色谱柱长度一定时，塔板数 n 越大(塔板高度 H 越小)，被测组分在柱内被分配的次数越多，柱效能则越高，所得色谱峰越窄。它成功解释了色谱流出曲线的形状和浓度极大值对应的tR ,阐明了保留值与K的关系,评价柱效（n，σ） (2)不同物质在同一色谱柱上的分配系数不同，用有效塔板数和有效塔板高度作为衡量柱效能的指标时，应指明测定物质。 (3)做出了四个与实际不相符的假设，忽略了组分在两相中传质和扩散的动力学过程。柱效不能表示被分离组分的实际分离效果，当两组分的分配系数K相同时，无论该色谱柱的塔板数多大，都无法分离。 (4)排除了一个重要参数——流动相的线速度u，因而塔板理论无法解释同一色谱柱在不同的载气流速下柱效不同的实验结果，也无法指出影响柱效的因素及提高柱效的途径。 塔板理论的特点和不足 1) 速率方程（也称范弟姆特方程式）：吸收了塔板理论的概念，结合了影响塔板高度的动力学因素 减小A、B、C三项可提高柱效； 2. 速率理论(rate theory)——影响柱效的因素 存在着最佳流速； A、B、C三项各与哪些因素有关？ A = 2λdp dp：固定相的平均颗粒直径 λ：固定相的填充不均匀因子 固定相颗粒越小dp↓，填充的越均匀，A↓，H↓，柱效n↑。表现在涡流扩散所引起的色谱峰变宽现象减轻，色谱峰较窄。 涡流扩散项A的大小，与填充物的平均颗粒直径dp(单位为cm)有关，也与固定相填充不均匀因子λ有关 注：颗粒太小，柱压过高且不易填充均匀。 A─涡流扩散项 空心毛细管柱（0.1~0.5mm），A=0，n理较高 ? ：因载体填充在柱内而引起气体扩散路径弯曲的因素-弯曲因子 Dg：试样组分在气相中的扩散系数（cm2·s-1） B/u —分子扩散项，也称纵向扩散项 (1) 存在着浓度差，产生纵向扩散（产生原因）; (2) 扩散导致色谱峰变宽，H↑(n↓)