食管鳞癌血管内皮生长因子C表达和基因沉默干预临床及实验的研究.pdfVIP

食管鳞癌血管内皮生长因子C表达和基因沉默干预的临床与实验研究 中文摘要 食管鳞癌血管内皮生长因子C表达和基因沉默干预的 临床与实验研究 中文摘要 第一部分：食管鳞癌组织中血管内皮生长因子C、D及其受体mRNA 的表达及其临床意义 endothelial factor-C，VEGF—C)、 目的研究血管内皮生长因子C(vasculargrowth endothelial 血管内皮生长因子D(vasculargrowth endothelial endothelial factor VEGFR一2(vasculargrowth factor growth (real．timePCR)，检测24例正常食管组织样本和60例食管鳞癌(esophagealsquamous cell 织，VEGF．C、VEGF．D及其受体mRNA可能与食管鳞癌发生、发展有关。 第二部分：血管内皮生长因子C蛋白表达 和食管鳞癌临床病理特征和预后的相关性研究 目的研究VEGF．C在食管鳞癌中的表达，并分析其与临床病理特征、预后的关 系。方法运用免疫组织化学法检浈mJ73例食管鳞癌组织中VEGF．C蛋白水平表达情况， 统计学分析免疫组化细胞染色、临床病理参数和预后的关系。结果食管鳞癌组织中 oftumor node metastasis， 润深度(depth invasion，pT)(P=O．021)、淋巴结转移(1ymph 目的 利用稳定转染VEGF．C过表达或基因沉默质粒的TE．1细胞株，分析 VEGF．C在对食管癌细胞增殖、转移、癌灶形成和药物敏感性的影响，并建立裸鼠皮 下荷瘤模型，分析VEGF．C在裸鼠体内对食管癌生长的影响。方法对于转染VEGF．C 过表达和基因沉默质粒的TE．1细胞株，采用CCK．8试剂盒测定其细胞的生长率。各组 细胞经顺铂处理后计算增殖率以评估VEGF．C对化学敏感性的影响。采用显微镜计数 Ⅱ 食管鳞癌血管内皮生长冈子C表达和基因沉默干预的临床与实验研究 中文摘要 进行细胞迁移实验和克隆形成率分析，以确定VEGF．C在肿瘤细胞转移中的作用；以 定量染色质免疫沉淀反应确定食管癌中VEGF．C的下游效应物CNTN．1。另将生长4周 肿瘤细胞株，每隔三天用游标卡尺测量肿瘤直径，计算肿瘤体积，建立肿瘤生长曲线。 细胞对顺铂的敏感性未受影响，细胞集落数目增长了1．1倍，CNTN．1转录水平升高； 而shRNA．2转染的TE．1细胞生长受到抑制，生长率为对照组的72％，上清液中转移细 胞数量减少50％，细胞对顺铂的敏感性未受影响，细胞癌灶增值率低，CNTN．1转录 水平降低。动物实验结果显示，在注射转染pEGFP．VEGF．C细胞的裸鼠肿瘤体积显著 增长，而注射转染VEGF．CshRNA细胞的裸鼠肿瘤显著减小。结论在体外，VEGF．C 过表达可促进食管癌细胞增殖、转移和癌灶形成，VEGF．C基因沉默可抑制食管癌细 胞增殖、转移和癌灶形成，CNTN．1可能是食管癌中VEGF．C的下游效应物。基因沉 能是一个潜在的治疗人食管癌的方法。 关键词：食管癌；血管内皮生长因子C；基因沉默；过表达 作 者：刘鹏飞