大陷胸汤对大鼠急性胰腺炎时TNF-α和IL-6改变影响.pdfVIP

前 言 急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是常见急腹症之一。急性胰腺炎是因 胰腺分泌的各种消化酶被各种因素异常激活，导致对胰腺组织本身极其周围脏器 产生消化，即“自我消化”作用。这些因素主要有胆汁的返流、酒精中毒、胰腺 循环障碍等。由于疾病进一步发展，体内的单核巨噬细胞、中性粒细胞和淋巴细 胞等，产生和释放大量的内源性介质，包括多种细胞因子，如肿瘤坏死因子（TNF）、 [1] 白细胞介素1 （IL-1）、白细胞介素6 （IL-6）、血小板活化因子（PAF）等 。因 此，细胞因子网络和免疫功能紊乱很可能是急性胰腺炎易从局部病变迅速发展成 为全身炎症反应综合征和多器官衰竭的主要原因，因此细胞因子已经成为关注的 焦点。在治疗上分为非手术治疗和手术治疗，非手术治疗中主要采用抑制胰腺分 泌及抗胰酶疗法，主要的药物有抗胆碱类药物，如654-2 和阿托品等；受体阻滞 剂，如甲氰咪胍；抑肽酶有一定的抑制胰蛋白酶合成作用。近年来应用生长抑素， 如善宁、施他宁能有效抑制胰腺的分泌功能。但副作用大，且价格昂贵。 急性胰腺炎中医无此病名，归属于中医“胃痛”、“腹痛”、“结胸”等范畴。 AP 的发生多由外感六淫、饮食不节、胆道石阻等导致实热病邪与水相结，结聚 于胸胁，发展至心下，甚至发展到全腹。中医认为“实则攻之”，通里攻下药有 助于排毒散结，运用通法并不拘泥于燥屎是否存在，正如温病学家吴又可所言“攻 邪勿拘结粪”，通过攻下使毒有出路，结能通散。本研究所用大陷胸汤是张仲景 《伤寒论》中峻下逐水，泻热破结的常用著名方剂。据临床报道本方治疗急性胰 腺炎效果颇佳，能迅速消除胰腺水肿，使邪去元气自复，促使破坏的胰腺组织恢 复。对于本方的药理研究仅局限于其对中毒性急性肾功能衰竭的保护作用、利尿 作用、导泻作用和对免疫功能的影响。而关于本方对急性胰腺炎病变进展过程中 对细胞因子表达的影响尚未见报道。 本课题拟从TNF-α和IL- 6 着手，通过复制急性胰腺炎病变模型，运用放免 染色方法，观察大陷胸汤对急性胰腺炎模型大鼠血液中血清淀粉酶的变化情况、 对TNF-α和IL-6 的表达的影响以及对模型大鼠胰腺病理改变的影响。并通过与 各模型对照组进行严密的随机对照实验和科学统计分析，探求大陷胸汤治疗急性 胰腺炎的作用机理，为临床治疗提供客观理论依据，丰富和拓展中医药的应用范 围。 4 材料和方法 1 材料 1.1 实验动物与分组: 选用健康成年Sprague-Dawley(SD)大鼠40 只，雌雄各半，体重180-220g， 由贵阳医学院实验动物中心提供。手术前用标准鼠食饲养1 周，完全随机分成4 个组，每组 10 只。分别为第Ⅰ组为SAP 模型组，第Ⅱ组为假手术组，第Ⅲ组为 SAP+善宁组，第IV 组为SAP+大陷胸汤组。SAP 组同时作为治疗对照组。 1.2 主要试剂、仪器及药品: 1.2.1 试验仪器: 水平离心机LDS-10 北京医用离心机厂 电热恒温水浴锅 北京市医疗设备厂 FA1004 型电子天平 上海天平仪器厂 HITACHI 7170 型自动生化分析仪 日本日立公司 OLYMPUS BX50 显微镜 日本OLYMPUS 公司 SW-695 型智能放免Y 射线测量仪 上海原子核研究所日环一厂 LEZCARM2135 石蜡切片机 德国LEZCA 公司 1.2.2 试剂: 白细胞介素—6(IL-6)放免试剂盒 解放军总医院科技开发中心放 免研究所 肿瘤坏死因子—α(TNF-α)放免试剂盒