ARL-1基因沉默及基因定点突变对丙烯醛代谢影响.pdfVIP

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2017-09-19 发布于安徽
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ARL-1基因沉默及基因定点突变对丙烯醛代谢影响.pdf

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结论 1、 si 成功构建了能有效抑制细胞内ARL-1表达的ARL．1RNA慢病毒载体，性。 2、剐甩．1蛋白中赖氨酸(78)突变为谷氨酸降低了ARL-1对丙烯醛的还原活性，说明赖氨酸(78)是ARL一1蛋白中与酶活性密切相关的活性位点。关键词醛糖还原酶类似蛋白酶．1(ARL．1)；siRNA；慢病毒载体： HCT8细胞；组氨酸标记的蛋白纯化； 6 in Site--Directed andGene ARL—-1For Silencing Mutagenesis MetaboUsmofAcrolein the ABSTRACT ective Obj siRNALentivirusandconfirmationofits 1、Constructioof．ARL一1 and wereutilizedtotestthefunctionofARL一1siRNALentivirus． assay activity onthe aminoacidswhichare forARL一1 2、Investigationkey responsible catalytical activity Methods First：ConstructionofARL．1siRNALentivirusandcomfirmationofitsFunction toLentiviralRNAi Lentiviralwith According ExperssionSystem’sprotocol，a ofsiRNA toARL-1wasestablished．HCT8cellwith expression targeting high ARL一1 Wasusedasamodelforviral expression endogenous totestthefunctionof and wereutilized ARL-IsiRNA enzymaticactivityassay Lentivirns． whichare forARL一1 onthe aminoacids Second：Investigationkey responsible acroleinWasusedasthesubstrateforARL·1 catalyticalactivity enzymeactivity wasmutatedtoGlutamatewith mutated was Lysine specialprimers