低剂量环磷酰胺对脓毒症大鼠急性肺损伤影响实验的研究.pdfVIP

遵义区学晓嘎士研究生平生论文 前言 急性肺损伤(ALI)是由严重感染、创伤和休克等多种病因所致弥漫性肺实 质损伤，是急性呼吸窘迫综合征(acute distress respiratory 个早期阶段111。机体受到感染、内毒素、休克等多种原因刺激时，可导致失控性 inflammatory 全身炎症反应(systemic response 伤(ALt)。肺脏的解剖、组织学特点，使其成为SIRS损伤的首位靶器官。它的 病理变化主要表现为水肿(非心源性肺水肿)、出血、炎细胞浸润、细支气管和 肺泡上皮细胞脱落坏死、肺萎陷等“。ALI在细胞水平上表现为单核巨噬细胞、 中性粒细胞等炎性细胞的浸润；在分子水平上则表现为众多促炎性细胞因子、黏 附分子的过度表达，伴有多种炎症介质的产生。上述炎症形成级联反应，导致肺 组织广泛损害，累及诸多肺外器官，如急性呼吸窘追综合征(ARDS)或多脏器 organ MODS)a有研究 功能障碍综合征(multipledysfunctionsyndrome， 其中，NF-xB在调控肿瘤坏死因子．n、白介素．1B、IL-6、IL-8、巨噬细胞炎 B还可与其它转录 附分子(ICAM)．1、血管细胞黏附分子。1等黏附分子；NF．K 因子相互作用，共同调节ALI肺内的炎症反应。ALI的主要临床表现为顽固性低 氧血症、呼吸频数和呼吸窘迫，胸部x线片显示双肺弥漫性浸润影，后期多并 发多器官功能障碍【”。在治疗上，临床暂无实用而有效的方法。为了防止』～U、 ARDS的发展、恶化，寻找一个有效的方法，对于临床来说非常重要161。为此， 人们进行了大量的基础和临床研究，但是效果均欠满意。 析原理．点计数法．测定反映肺泡萎陷程度的肺泡扩张度(vv)【7’81以及肺损伤评 分法f21观察其对大鼠急性肺损伤肺组织的病理变化以及使用免疫组化法观察其 K B、I 对NF．K B．n活性的影响，旨在探讨低剂量CY对ALI的防治作用。 论文：低赉ll量环磷戢胺对被毒症大鼠急性肺损伤影响的实验研究 蔓蔓量季晓磺士研竞生平_生论主 材料与方法 l实验分组： 中心提供)作为实验动物．雄性，体重250～3009。将40只SD大鼠随机分为 性对照组(ALI模型+盐水，lO只)和空白对照组(正常大鼠+盐水，10只)。 2药物的制备： 1／100(g){lnl)。 O。4mg／ml，每只鼠需注射的CY量=鼠的体重(g)×l／100(g){盯d}。 2．3地塞米松的制备(5mg／kg)：5 mg／支，加生理盐水溶解至10ml。使之成为 O．5 mg／n[1l，每只鼠需注射的DEX量=鼠的体重(g)×moo(g){Inl)。 3动物模型： 采用内毒素(LPS)腹腔注射方法，模拟幅床先有腹腔感染后有全身脓毒 症的发病方式制作ALl动物模型。ALl动物模型的制作：所有大鼠先称重，后腹 腔注射LPS(5mg／kg)【…，术后的大鼠均自由进食饮水。空白对照组大鼠的制 作：大鼠未进行特殊处理，仅注射等量生理盐水。阳性对照组在模型制作后立即 mg／kg)【10l。实验组在模型制 给予腹腔内注射单剂(aSingle．Dose)DEx(5 作后立即给予腹腔内注射单剂低剂量CY(4mg／kg)Illl。阴性对照组在模型制作 后立即给予腹腔内注射等量生理盐水。 4标本的采集与保存： 所有大鼠均在建模成功后的第6h，经1％戊巴比妥钠40m鲫【g腹腔麻醉， 处死大鼠留取肺组织(左肺)。所有标本经20％的甘油冻存液包埋后放置-80C冰 箱保存备用。 5检测指标和方法： 肺组织采用石蜡包埋、切片，经HE染色常规病理学光镜检查观察肺组织的 形态、出血、炎细胞浸润等，且用免疫组织化学法(SAB