反义酸性转化酶基因对低温贮藏马铃薯块茎还原糖和淀粉含量的影响.PDFVIP

维普资讯 植物生理与分子生物学学报，JournalofPalntPhysiologyandMolecularBiology2005，31(5)：533—538 533 反义酸性转化酶基因对低温贮藏马铃薯块茎还原糖和淀粉含量的影响 王清1,3，黄惠英 ，张金文 ，李学才 f甘肃农、l人学-农学院， tr肃省作物遗传改 良和种质创新重点实验室， 生命科学技术学院，兰卅I730070) 摘要：对 2个含有酸性转化酶 (Aclnv))L义基因的转基 育种、作物改 良方面的突出作用，使我们设想采 因马铃薯品系及对照品种进行低温贮藏(4℃)及室温还 用反义RNA技术并进行遗传转化引入控制低温糖 暖处理。随低温贮藏时间的延长，供试材料均表现出 化的反义基因来抑制 “低温糖化 ”，实现对现有 还原糖含量升高，总淀粉含量下降的趋势。低温处理 马铃薯加工品种 的遗传改 良。 40d时， A“c转Atlantic”和 “Ac转甘农薯2号”的还 原糖含量比未转基因品种低 23％和 l8％。总淀粉含量 酸性转化酶(Aclnv)是马铃薯块茎低温糖化的 分别比未处理前下降约 1．0％和 1_3％，支链淀粉含量分 关键酶，也是控制不可逆转的生化步骤 —— 非还 别下降约 1．4％和 1．7％，淀粉直，支比明显低于对照， 原性的蔗糖向还原性糖转化的限速酶 。早在 1966 分别为0．29和 0．38。块茎的石蜡切片显示，转基 因块 年，Pressay(1969)就提纯了该酶并对其抑制作用 茎中深蓝色淀粉颗粒明显少于未转基因对照。另外，对 进行 了研究。此后，Zhou等(1994)、Zrenner等 低温贮藏的块茎室温还暖后 ，2个转基因品系的还原糖 含量仍低于对照品种。实验结果证明反义Aclnv基因对 (1993，19961从低温诱导的马铃薯块茎 中克隆了 低温贮藏下块茎还原糖和淀粉含量具有下向调节作用。 AclnvcDNA序列并构建了反义AcInv基因植物表 达载体，研究了转基因植株抗低温糖化的效果。 关键词：马铃薯 (SolanumtuberosumL．)：反义Aclnv 其结果是在转基因马铃薯块茎可溶性糖含量保持稳 (酸性转化酶)基因；还原糖含量；淀粉含量 定的基础上，己糖与蔗糖的比率明显降低，说明 中图分类号：Q74 酸性转化酶在低温糖化过程中的重要作用。2000 年，我们通过 GenBank发表 的Aclnv基因序列， 马铃薯加工企业经常遇到的问题，就是块茎 克隆并构建了反义AcInv基因植物表达载体，获 低温贮藏过程 中的糖化现象。块茎还原糖含量的 升高会加剧薯片热加__[过程中还原糖与氨基酸的美 得 了转基因植株 。但是，这些转基因植株抗低温 拉尔反应，使炸片颜色加深，口感苦涩 。块茎 糖化的效果如何?低温贮藏下还原糖含量如何变 糖化与 品种对低温 的敏感程度 (Lauer和 Shaw 化?反义 Aclnv基因导入马铃薯植株后，是否会 影响淀粉的组成及淀粉的降解?本文就这些问题进 1970)、栽培条件、营养状况 以及块茎成熟度、 块茎贮藏温度有关(Cottrell等 1993)。其 中，在正 行 了研 究 。 常休眠生理状况下，贮藏温度足影响糖化程度高 低不等的重要因素。低温能够引起与淀粉 降解有 1 材料与方法 关的转化酶 、淀粉磷酸化酶及淀粉酶活性 的急剧