牛副结核分支杆菌的研究进展.docVIP

牛副结核分枝杆菌的研究进展 李景玉1刘爱国1梁大勇1郝贵君2李志彬3赖俊英4 （1白城市畜牧总站、2洮北区动物监督所、3洮北区东风乡畜牧站、4镇赉县镇赉镇畜牧兽医技术服务站） 关键字：牛副结核分支杆菌 分子病原学 检测 核酸疫苗 副结核病(Paratuberculosis)是由副结核分枝杆菌即禽分枝杆菌副结核亚种(Mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis,MAP)引起的一种以反刍动物为主要宿主的慢性增生性、顽固性肠炎和进行性消瘦为特征的传染病，也称Johne’s病[1,2]。牛感染MAP后，直到2~5岁才会出现临床症状，病牛表现慢性腹泻、体重迅速减轻、奶产量和繁殖力下降。除反刍动物外，猪、马、野生动物等也有发病的报道，所以该病现己成为危害非常严重的传染病之一，被OIE列为必报传染病，我国中国 也删掉 将其列入三类传染病。 1910年TrowtTrowt（1910） 根据按 柯赫(Koch’s)法则成功首次???功 地在实验室分离到该病原体，并实验性地感染牛复制出副结核病[3]。美国的Chiodini[4](1983年)等证明从克隆病(Crohn’s disease,CD)患者体内分离到的菌株染色体中含有MAP的特异DNA序列IS900，这一发现不仅给医学界，而且给兽医界带来了很大震动，此后，很多资料表明。此后国内外对MAP进行了大量的系统性研究，研究结果表明，MAP不仅是危害反刍动物的重要病原，而且 MAP与人类的CD存在联系。所以，Johne’s病越来越受到世界各国的瞩目。笔者欲为此，作者根据国内外相关研究资料对 从删掉 副结核分枝杆菌的分子病原学，检测技术及疫苗的研究进展进行综述现状进行分析，以期为指导该病原的深入研究提供参考依据。 。 1 副结核分支杆菌 禽分枝杆菌副结核亚种(Mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis,MAP)为平直或微弯的杆菌，因有分枝生长的趋势而得名。最显著特性是胞壁含有大量类脂，可达菌体干重的40%左右，生长形成粗糙菌落，而且也难以用一般染料染色。但在抗酸染色后，含有3%HCI的酒精又不易使之脱色，这一类能抵抗盐酸酒精脱色的细菌称为抗酸菌。本属菌种类颇多，属内除结核分枝杆菌复合群(包括结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌)和麻风分枝杆菌外统称为非结核分枝杆菌[5]，其中部分是致病菌或条件致病菌。本属菌在自然界分布广泛，许多是人和多种动物的病原菌。对动物有致病性的主要是结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、副结核分枝杆菌等。 MAP为需氧、革兰氏染色阳性、无运动性的非结核分枝杆菌(0.2~0.5μmⅹo.5~1.5μm)。在人工培养基上生长缓慢，最适生长温度为37.5℃，需要1~2个月才能长出针尖大小的白色、坚硬、粗糙的菜花样小菌落，且依赖分支杆菌素，少数菌株可产生黄色素，在组织或粪便中成团或成丛存在。副结核病的潜伏期长，患畜长期大量排菌，传染性强，很难净化[6]。 MAP主要由消化道感染，受感染的动物即使无明显的临床症状，也可能随粪便排出病原菌。在患畜体内，MAP主要位于肠道和肠系膜淋巴结处。感染通常是由于食入临床病例或亚临床带菌者的粪便或被污染的食物引起。有时病原菌可侵入血液，因而能随乳汁和尿排出体外。从肝、肾、脾和性腺中也可以分离出病原菌，35%临床病例及l既亚l喻床者的乳汁中携带有病原菌，尤其是初乳，病原菌含量更高。经子宫感染是副结核病传播的一种重要途径，有临床症状的乳牛子宫感染率为50%，亚临床症状的病例子宫感染率为9%。少数感染副结核病公牛的精液中也携带有MAP。该菌对自然环境抵抗力较强，在河水中可存活163天，在粪便和土壤中存活11个月，在牛乳和甘油盐水中可存活10个月。对热较敏感，63℃30min、70℃20min、80℃5min即可被杀死。抗强酸强碱，在5%草酸、5%硫酸、15%安替福民、4%苛性钠溶液中30min仍保持活力。而3%来苏儿30min、3%福尔马林20min、3%~5%石炭酸5min内可将其杀死[7]。该菌是胞内生长菌，细菌侵入机体后，在机体内首先产生细胞免疫，然后出现体液免疫。细胞免疫随着病情加重而降低，体液免疫随着病情发展而增强。 2 副结核分支杆菌分子病原学 2.1研究者通过各种试验方法对副结核分枝杆菌进行了分型：副结核分枝杆菌进的分型 2.1.1 用聚合酶链式反应（PCR）方法分型聚合酶链式反应（PCR）法分型 ，例如：删掉 在Juan等[9]研究中，应用PCR方法对分离自西班牙不同地区的164株驯养反当动物的MAP菌株(83株来自山羊、78株来自奶牛、3株来自绵羊)分析发现:31.7%(29株来自奶牛、20株来自山羊、3株来自绵羊)