样品采集技巧.pptxVIP

样品采集技术;一、采样的一般原则 1．凡是血液凝固不良、鼻孔流血的病、死动物，应耳尖采血涂片，首先排除炭疽，炭疽病、死的动物严禁剖检。 2．采样时应从胸腔到腹腔，先采实质器官做到无菌，避免外源性的污染，最后采污染的组织，如胃肠组织、粪便等。 3．采取的病料必须有代表性，采取的组织器官应病变部位明显，采取病料时应根据不同的疫病或检验目的，采其相应血样、活体组织、脏器、肠内容物、分泌物、排泄物或其他材料。病因不明时，应系统采集病料。;4．病料应在使用治疗药物前采取，用药后会影响病料中微生物的检出。死亡动物的内脏病料采取，最迟不超过死后6小时(尤其夏季)，否则，尸体腐败，难以采到合格的病料。 5．血液样品在采集前一般禁食8小时。采集血样时，应根据采样对象、检验目的及所需血量确定采血方法与采血部位。 6．采样时还应考虑动物福利，并做好个人防护，预防人畜共患病（如高致病性禽流感、狂犬病、炭疽、布鲁氏菌病、牛结核病等）感染。 7．防止污染环境，防止疫病传播，做好环境消毒及废弃物的处理。;二、采样方法 1.诊断时 采集病死动物的有病变的器官组织。采集样品的大小要满足检疫检验的需要，并留有余地，以备必要的复检使用。 2．免疫效果监测时 动物免疫后14--21天，随机采集同群动物血清样品30份。 3．疫情监测或流行病学调查时 根据区域内养殖场户数量及分布，按一定比例随机抽取养殖场户名单，然后每个养殖场户按估算的感染率，计算采样数量，随机采取。;三、采样时机 根据检验项目的不同，选择适当的采样时机十分重要。样品是有时间要求的，应严格按规定时间采样。 一般情况下，对于采集的常规病料，有临诊症状需要做病原分离的，样品必须在病初的发热期或症状典型时采样，病死的动物，应立即采样。 采集血液样品，如果是用于病毒检验样品，在动物发病初体温升高期间采集，对于没有症状的带毒动物，一般在进入隔离场后7天以前采样；用于免疫动物血清学诊断时，采集双份血清监测比较抗体效价变化的，第一份血清采于病的初期并作冻结保存，第二份血清采于第一份血清后3～4周，双份血清同时送实验室；用于寄生虫检验样品，因不同的血液寄生虫在血液中出现的时机及部位各不相同，因此，需要根据各种血液寄生虫的特点，取相应时机及部位的血制成血涂片，送实验室。;四、采样数量 1．诊断时 1～3只(头)病死动物的有病变的器官组织。 2．免疫效果监测时 每群血清样品应采集30份。 3．疫情监测或流行病学调查时 采集血清、各种拭子、体液、粪尿或皮毛样品等，采样数量可根据动物年龄、季节、周边疫情情况估算其感染率，然后计算应采样品数量。 4．种群疫病监测净化 要制定疫病监测净化方案，按照方案确定的采样次数及采样日期，逐头采样。;五、 采样器械物品的准备 （一）、器 械 1．采样箱、保温箱或保温瓶、解剖刀、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、注射器及针头等。 2．样品容器包括小瓶、玻片、平皿、离心管及易封口样品袋、塑料包装袋等。 3．试管架、铝盒、瓶塞、无菌棉拭子、胶布、封口膜、封条、冰袋等。 注意：采样刀剪等器具及样品容器须无菌。; （二）、采样记录用品 不干胶标签、签字笔、记号笔、采样单、采样登记表等。 （三）、保存液 阿氏液(Alsevers)、30％甘油盐水缓冲液、肉汤、PBS液、双抗等。 （四）、人员防护用具 口罩、防护镜、一次性手套、乳胶手套、防护服、防护帽、 胶靴等。BS液、双抗。 ;六、 血液样品的采集方法及技术要求 采集动物血液是动物疫病采样的一项重要内容，对疫病监测意义重大。采血过程中应严格保持无菌操作。采血前，应用酒精棉对采血部位局部消毒。采血完毕，局部消毒并用干棉球按压止血。采血用的注射器及试管必须保持清洁干燥无菌。在采血、分离血清过程中，应避免溶血。几种常用的动物主要采血方法介绍如下。;1、家禽的采血方法 ---雏禽心脏采血 左手抓鸡，采样人员手持采血针，平行颈椎从胸腔前口插入回抽见有回血时，即把针芯向外拉使血液流入采血针。 ---成年禽心脏采血 成年禽只采血可取侧卧或仰卧保定。 (1)侧卧保定采血 助手抓住禽两翅及两腿，右侧卧保定，在触及心搏动明显处，或胸骨脊前端至背部下凹处连线的1／2处消毒，垂直或稍向前方刺入2—3厘米，回抽见有回血时，即把针芯向外拉使血液流入采血针。 (2)仰卧保定采血 胸骨朝上，用手指压离嗉囊，露出胸前口，用装有长针头的注射器，将针头沿其锁骨俯角刺入，顺着体中线方向水平穿行，直到刺入心脏。;------翅静脉采血 在翅下静脉处消毒，手持采血针，从无血管处向翅静脉丛刺入，见有血液回流，即把针芯向外拉使血液流入采血针。 也可