转hTNF-α基因聚球藻7002的培养与光合作用.pdfVIP

转hTNF．0【基因聚球藻7002的培养与光合作用 摘要 本文以转hTNF．0【基因聚球藻7002为研究对象，寻找其最佳培养 方式与条件，以期为它的产业化奠定基础。本文首先通过摇瓶实验对 影响转基因聚球藻生长的主要因素进行了较系统的研究，进而在2．5L 光生物反应器中对其进行混合营养培养，并利用光合作用特性曲线对 混合营养中光合作用与有机碳利用之间的关系进行了初步研究。本论 文的主要工作包括： (1)在摇瓶实验中初步确定转基因聚球藻的培养条件。实验结果 umol 表明：转基因聚球藻生长的最适光强为i00 m。2s～；最适生长温 内生长良好；利于转基因聚球藻生长的无机氮源为硝酸盐，硝酸钠最 佳浓度为i．09／L；有机碳源对藻的生长有促进作用，转基因聚球藻 可以利用的有机碳源有葡萄糖、蔗糖、N一乙酰葡萄糖胺；同时补加无 机碳和有机碳比单独添加有机碳对藻细胞生长的促进作用更显著。 (2)在2．5L光生物反应器中进行转基因聚球藻的混合营养培养 条件的研究。实验结果表明：适量配加cO。是促进藻生长的有效手段， 在本实验条件下添加cO，的最佳比例为总通气量的3％；即使在饱和 的无机碳源下，有机碳源仍能对藻细胞生长起促进作用，其最大细胞 密度可达到光自养下的2．3倍，其中N一乙酰葡萄糖胺对细胞生长的 II 促进作用比葡萄糖、蔗糖更显著，且因其不易被细菌利用，更适于作 为转基因藻混合营养培养的有机碳源；适当的通气量可以加速细胞的 生长及对有机碳源的利用；光强在转基因聚球藻培养液中的衰减可用 下式表示：，=Ioe州“6“1””OD7删 (3)研究了转基因聚球藻的一些生理特性，主要是利用光合作用 曲线分析探究混合营养中无机碳与有机碳代谢之间的关系。转基因聚 球藻在35C时光合放氧活性最强；以不同CO：为底物的光合放氧曲线 表明适当地提高基质中CO。(无机碳)的浓度，藻细胞的光合放氧活性 增强；在混合培养中，有机碳的加入会抑制低c0。浓度下生长的藻细 胞的初时光合放氧，但经过一个对有机碳转运代谢系统的诱导、激活 过程后，有机碳源对藻细胞的光合放氧速率有较强的促进作用；当有 机碳源与无机碳同时加入时，藻的初时光合放氧速率大大提高，说明 细胞利用无机碳和有机碳的机制之间存在某种相互作用。 关键字：转基因聚球藻，培养条件，混合培养，光合作用，有机碳源 Cultivationand of Photosynthesis Transgenic Synechococcus sp PCC7002 with hTNF—uGene ABSTRACT Inrecent inthe years，the of great progress genetic engineering has touse to cyanobacteriapromisedtransgeniccyanobacteria pr