Preliminary study on extraction, separation and preliminary preparation of total flavonoids from Hubei crabapple湖北海棠总黄酮的提取分离及制剂前初步评价研究.pdfVIP

摘 要 目的 通过对湖北海棠有效部位的制备工艺进行研究，确定其有效部位提取、纯 化的最佳工艺条件，并拟定了其质量标准草案及对其制剂前的初步评价进行研究， 为湖北海棠今后剂型的研究提供一定的依据。 方法 （1）采用星点设计-效应面法对湖北海棠有效部位的提取工艺进行优化， 结果：以乙醇浓度、溶剂用量、提取时间为自变量，以总黄酮和根皮苷含量的综合 评分为因变量，将各数据输入软件中，从而从图上的较佳区域直接读出最佳的工艺 条件；（2 ）以优选出的最佳提取工艺条件提取有效部位，以总黄酮的含量为评价指 标，采用大孔吸附树脂法进行纯化，确定总黄酮纯化工艺条件；（3 ）采用高效液相 色谱法，建立湖北海棠提取物指纹图谱，并进行相似度分析；（4 ）分别采用薄层色 谱法、紫外分光光度法、高效液相色谱法对湖北海棠有效部位进行定性定量分析， 并检查有效部位的水分含量、干燥失重、炽灼残渣、重金属及砷盐等项目，进而拟 定了湖北海棠有效部位的质量标准草案；（5 ）通过对提取物的平衡溶解度、油/水分 配系数进行测定，对提取物的制剂前评价进行了研究。 结果 （1）通过对湖北海棠总黄酮提取、分离纯化工艺参数的考察，确定了其最 佳提取工艺条件为：用 8 倍量 70%乙醇，回流提取2 次，每次 150min；（2 ）湖北海 棠总黄酮最佳分离纯化工艺为：选用 E 型大孔树脂，树脂与药材的质量比为 1:1.74， 上样药液浓度为 0.15g/mL，上样流速为 2BV/h ，树脂径高比为 1:10，洗脱时先用 4BV 水洗除杂，再用 4BV70% 乙醇洗脱，洗脱速度为 1BV/h；（3 ）确定了湖北海棠提取 物 10 批样品指纹图谱共有模式，且相似度均在 0.9 以上；（4 ）湖北海棠总黄酮有效 部位质量标准研究结果：含水量为 3.90%，干燥失重为4.02% ，炽灼残渣为 0.36% ； 薄层图谱显示供试品溶液与对照品溶液在相同位置显相同颜色斑点，含量测定结果 表明提取物中总黄酮含量为 92.20%，固形物平均得率为 13.73%。（5 ）湖北海棠提 取物在甲醇，95%乙醇中溶解度较大；在中性至弱碱性的磷酸盐缓冲液中溶解度也 较大，而在酸性缓冲液中溶解度较小；油水分配系数结果显示，湖北海棠提取物在 肠道不易被吸收。 结论 湖北海棠 70%乙醇提取物为湖北海棠的主要有效部位，主要含黄酮类化 合物，其中以根皮苷含量较高。其制备及分离纯化工艺简便、可行，适合工业化生 产；提取物质量标准合理、可行；提取物的制剂前初步评价结果为其生物利用度的 研究及剂型的选择提供一定的实验依据。 关键词 湖北海棠；提取工艺条件；纯化工艺条件；制剂前初步评价研究 The Preparation of the effective composition about estrogen-like effects of Malus hupehensis and Evaluation on pre-preparation Abstract Objective Through the study of the preparation process of effective part of Malus hupehensis, the best process conditions were determined, and the study of quality standard and evaluation on pre-paration of effective composition were formulated, and these all lay the foundation for further application of Malus hupehensis. Meth