艾滋病、梅毒实验室检测.ppt

3、HIV的基因结构及分型 HIV可分为HIV-Ⅰ和HIV-Ⅱ两型。HIV-1全长9181bp, HIV-2全长10359bp. （1）基因组成： HIV含3个结构基因和6个调节基因 Ⅰ: LTR-gag-pol-vif-vpr-tat-rev-vpu-env-nef-LTR. Ⅱ: LTR-gag-pol-vif-vpx-vpr-tat-rev-env-nef-LTR. (2) 两者的主要区别： ① Ⅰ型含有vpu，而Ⅱ型含vpx。 ② vpr和nef与其他基因的关系也不同： A HIV-Ⅰ的vpr与vif相互重叠，而nef与env不重叠； B HIV-Ⅱ的vpr与vif不重叠，而nef与env相互重叠。 （3）结构基因表达产物 HIV-Ⅰ HIV-Ⅱ 包膜蛋白基因env：gp160 gp120 gp41 gp140 gp105 gp36 群抗原基因gag： p55 p24 p18 p56 p26 p16 多聚酶基因pol： p65 p51 p31 p68 p53 p34  HIV感染机理 HIV病毒侵入人体后，其表面糖蛋白gp120与细胞表面受体蛋白CD4以高亲和力结合，吸附到宿主细胞上；gp120再与宿主细胞表面辅助受体相互作用，使病毒与宿主细胞膜更接近；gp41产生一系列构象变化，其N端的融合肽片段插入宿主细胞膜，导致病毒包膜与细胞膜的最终融合，病毒RNA进入细胞。 HIV对环境中理化学因素抵抗力均较弱，比HBV的抵抗力低得多。 对HBV有效的消毒和灭活方法均适用于HIV。 HIV对热很敏感，对低温耐受性强于高温。因此，可以用高温灭活病毒，在低温条件下保存病毒。 在室温（22~27℃）液体环境下HIV可存活15天以上；经56℃处理30 min可使HIV在体外对人的T淋巴细胞失去感染性，但不能完全灭活血清中的HIV；经过60℃ 3小时或80℃ 30min作用后不能检出感染性病毒。 HIV耐碱不耐酸 室温中0.5%次氯酸钠或75%酒精只需1min即不能检出RT酶活性； 0.2%次氯酸钠、0.1%家用漂白粉、0.1%戊二醛等5min即可灭活； 30%酒精溶液5min、20%酒精溶液10min可灭活HIV。 对紫外线不敏感，离开人体可存活数小时至数天。 实验室检测 检测目的 1.临床诊断 2.安全输血 3.流行病学调查、高危人群监测 4.自愿咨询检测VCT 5.抗病毒治疗后效果检测 6.抗病毒治疗耐药性检测 7.免疫功能测定 HIV检测实验室及管理要求 检测工作必须在经批准的艾滋病实验室内进行。未设置艾滋病实验室的机构或单位及未经备案或批准的艾滋病实验室不得开展相关的艾滋病检测工作。 国家对艾滋病检测实验室实行分类管理，按照实验室的职能、开展检测工作的性质及范围共分三类实验室，分别是艾滋病参比实验室、艾滋病检测确证实验室、艾滋病检测筛查实验室（包括：艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点） 。 必须立即开展或已经开展艾滋病检测工作而又暂时不具备艾滋病筛查实验室设置条件的单位，作为一种过渡，可以暂时设立“艾滋病检测点”。“艾滋病检测点”也必须达到安全防护的基本要求，并经省（自治区）卫生行政部门批准和备案。 艾滋病实验室的仪器设备应能满足安全防护要求。使用国家规定需要强检的仪器设备，必须由同级计量认证部门定期检定，非国家强检的仪器设备应定期维护和校准。 艾滋病检测工作中所使用的检测试剂，必须使用经国家食品药品监督管理局注册、中国药品生物制品检定所“批批检”合格，且在有效期内的试剂；推荐使用经临床质量评估敏感性和特异性高的试剂；严格按试剂盒操作说明书操作。 从业人员需经过培训，持证上岗。 1.艾滋病实验室应对所使用的艾滋病检测试剂实施定期监测，以保证检测试剂的稳定性。 2.艾滋病检测过程中，应严格按试剂操作说明书操作，作好质量控制。遇到疑难情况应报上一级实验室帮助解决。 3.按照《全国艾滋病检测技术规范》要求，作好实验记录、档案管理和保存工作。 4.每年参加省疾控中心艾滋病确认中心实验室或其委托的初筛中心实验室对各艾滋病实验室进行的室间质量考评。 HIV感染后体液变化 感染HIV后，机体针对HIV的抗原性物质产生相应抗体，在临床上具有重要诊断学意义的抗体由gpl