小鼠睾丸特异基因在生精细胞中阶段性表达的定量分析-动物学杂志.pdfVIP

　动物学杂志 Chinese J ournal of Zoology 　2009 ,44 ( 1) :39～46 小鼠睾丸特异基因在生精细胞中阶段性 表达的定量分析 郭 　睿 　李喜霞 　王惠珍 ( 山西医科大学生物化学与分子生物学实验室 　太原 　030001) 摘要 : 在 Balbc 小鼠精子发生过程中 ,许多基因都具有严格的时空表达特性 。实验利用半定量 RTPCR 验证了 12 个小鼠精子发生相关基因的组织学分布 ,采用 SYBR Green Ⅰ荧光定量 PCR 分析了它们在不同 发育阶段生精细胞中的差异表达 。结果显示 ,所有基因仅在睾丸组织中高表达 ; Prm1 、Prm2 、Tnp 1 、Tnp2 在长形精子细胞中的表达水平最高 ,分别是粗线期精母细胞阶段的 19 、28 、32 和 2 倍 ; Dnaj b3 呈上调 表达 ,在长形精子细胞中的含量是粗线期精母细胞阶段的 25 倍 ; A kap 4 在长形精子细胞阶段的表达水 平尤为突出 ,是粗线期精母细胞的55 倍 ; Sp ata3 和Sp ata4 在圆形及长形精子细胞中的表达量相近 ,分别 是粗线期精母细胞阶段的3 倍和 15 倍 ; hils 1 和 Tex24 在圆形精子细胞阶段的表达水平最高 ,分别是粗 线期精母细胞阶段的 19 和 14 倍 ; Sp ag4l 和 Pap olb 从粗线期精母细胞到长形精子细胞阶段呈明显的下 调表达 ,分别下降了45 %和 34 % 。结果提示 ,被检测的基因具有明显的阶段特异性表达特征 ,为深入研 究这些基因在小鼠精子发生过程中的作用提供了新资料 , 同时也为荧光定量 PCR 技术在精子发生相关 基因定量表达研究中的可行性提供了充分例证 。 关键词 : 精子发生 ;荧光定量 PCR ;小鼠;生精细胞 ( ) 中图分类号 :R3211 　文献标识码 :A 　文章编号 2009 013908 Stagespecif ic Expression Analysis of Mouse Testisspecif ic Genes in Spermatogenic Cells GUO Rui 　L I XiXia 　WAN G HuiZhen ( Dep artment of B iochemistry and Molecular B iology , Shanxi Medical University , Taiy uan 　030001 , China) Abstract :Many testisspecific and stagespecific genes are required for mouse spermatogenesis. In this study , semi quantitative RTPCR was used to confirm the tissue distribution of 12 mouse testicular genes , and fluorescence quantitative PCR labeled with SYBR Green Ⅰwas applied to demonstrate the stagespecific expression of candidate genes at different spermatogenic stages. The results showed that all the genes examined were highly expressed in testis. The expr