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第15卷第6期 中国生物化学与分子生物学报 V o l. 15,N o. 6 1999年12月 Ch inese Jou rnal of B iochem istry and M o lecu lar B io logy D ec. , 1999 噬菌体 RB69 D NA 聚合酶以不正确的核苷酸为 底物的聚合反应的稳态动力学研究 杨广微　刘　健 　胡美浩 (北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系, 北京　100871) 摘要　测定了 69 聚合酶以不正确的核苷酸( 、 以及碱基不配对的 ) 为 RB DNA rN T P ddN T P dN T P 底物进行聚合反应的稳态动力学常数, 并与 K lenow 酶进行了比较. 结果表明, RB 69 DNA 聚合酶 在以不正确的核苷酸为底物进行聚合反应时, 其K m 值与正确底物参入时相比有大幅度提高, 而 k cat 保持不变或下降幅度较小. 而 K lenow 酶在利用不正确的核苷酸为底物时, 与正确底物参入时相 比, 其 k cat 大幅度下降, 而K m (或K D ) 基本保持不变或上升较小幅度. 两种酶不同的动力学特点反映 出它们不同的底物选择机制. 关键词　 聚合酶, 片段, , , , 动力学参数 RB DNA K lenow dN T P rN T P ddN T P Character iza tion of K inetic Param eters for rNTP ddNTP Incorpora tion and dNTP M isincorpora tion by Bacter iophage RB69 D NA Polym era se YAN G Guangw ei, L IU J ian , HU M eihao ( , , , 100871) D ep artm ent of B iochem istry and M olecu lar B iology Colleg e of L if e S ciences P ek ing U niversity B eij ing 　 Abstract T he steady state k inetic param eters fo r rN T P ddN T P inco rpo ration and dN T P m isin co rpo ration by bacter