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全国心血管病实验室诊断与临床专题学术研讨会 大会交流
表1 急性冠状动脉综合征患者外周血T淋巴细胞亚
对象与方法
群及其表达HLA—DR抗原的变化
1.对象来源:所有检测对象来自我院住院患者.ACS
组,34例,男14例.女10例;平均年龄(51士12)岁.诊断
依据。根据心绞痛发作性质、持续时间、程度,以及CK-MB、
TaI检查诊断为UA或AM].正常对照组:同期26例健康
人作为对照组,男8例,女4例。平均年龄(52士13)岁.全注,‘P0.05与正常对照组比较差异有统计学意义
部来自健康体检者.所有患者均在人院后第2天空腹采肘
静脉血。 ’
讨论
2.主要试剂和仪器,CD3一PerCP单抗、PE—CD4单
抗、cD8一FITC单抗和HLA—DR—FrrC单抗;鼠IgGl一
免疫细胞浸润冠状动脉损害部位,包括巨噬细胞。T淋
PE同型对照、鼠IgGl--FrrC同型对照和鼠IgGl一PerCP
巴细胞和肥大细胞.这些细胞已经被怀疑引起斑块的不稳
同型对照(美国BD公司),FACSort流式细胞仪(美国BD
定‘扣.目前的研究认为机体的免疫系统的异常对斑块炎症
公司),淋巴细胞荧光抗体标记. 起着非常重要的作用。本研究显示ACS患者外周血中
3.方法z设2个实验管和1个对照管,实验管和对照管CD4+T淋巴细胞明显增多,且表达HLA—DR抗原的CD
分别加新鲜全血100一,第一个实验管加入20—CD3一
+4T淋巴细胞数量亦显著增多,表明ACS患者循环中T
PerCP单抗,CD4--PE单抗,CD8一FTrC单抗I第二个实
淋巴细胞及其亚群功能失调。而且存在表达DR抗原异
验管加入20肛LCD3一Pe疋P单抗,CD4--PE单抗和HLA
常.也说明CD4+T淋巴细胞被激活,提示免疫反应参与
—DR—FITC单抗。对照管加入同型对照抗体20止。混匀。
了ACS的发生和发展.HLA—DR在T细胞激活后可表
室温避光孵育30min。红细胞裂解液裂解红细胞,离心5
达数周。因此,HLA—DR是非常敏感的T淋巴细胞活化
min弃上清。用PBS洗涤后,用1%多聚甲醛PBS固定
指标.激活的T淋巴细胞通过分泌7一干扰素阻滞胶原合
10min,流式细胞仪分析. 成,从而干扰粥样斑块纤维帽中胶原网的维持和修复[3]。
4.流式细胞仪检测;应用BDFACSort流式细胞仪
分泌的7一干扰素激活巨噬细胞,后者可使胶原蛋白和弹
进行样本的三色分析.用Cellquest软件获取并进行分
力蛋白降解,使斑块破裂,导致局部出血和血栓形成.淋巴
析。分别设门圈定CD3细胞门内收集10000个细胞. 细胞激活的确切机制尚待进一步研究.
以双色点图显示各种细胞的表达,以百分比表示细胞
参考文献+
数量.
Ⅳ
5.统计学分析:全部数据输入计算机用SPSS软件进
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