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基于siRNA 的RNA 干扰技术在肿瘤治疗中的应用 冉金时 生技1401 Jinshi_Ran@zju.edu.cn 摘要：RNA 干扰技术（RNA interference，RNAi）是指利用短双链RNA——siRNA （short interference RNA）特异性抑制同源基因表达，导致基因沉默。作为一种新兴基因沉默的手 段，其在生命科学研究中被越来越多的应用。本文主要介绍RNA 干扰技术在治疗肿瘤方面的 应用及研究进展。 关键词：RNAi，siRNA，肿瘤。 1.RNA 干扰概述 的一员，它能以一种ATP 依赖的方式 逐步切割由外源导入或者由转基因， RNA 干扰（RNA interference, 病毒感染等各种方式引入的双链RNA， RNAi），是通过小干扰RNA(small 切割将RNA 降解为19-21bp 的双链 interference RNA, siRNA)造成目的 RNAs(dsRNAs)，每个片段的3’端都有 mRNA 特异性降解, 从而使基因转录后 [1] 2 个碱基突出。Dicer 在催化过程中以 沉默的一种现象 。这一现象广泛存在 二聚体的形式出现，其催化结构域在 于自然界, 是生物体进化过程中抵御 dsRNA 上反向平行排列，形成四个活性 外来基因侵害的一种机制, 为稳定基 位点，但只有两侧的两个位点有酶切 因组发挥了重要作用。 活性，这两个位点在相距约22nt 距离 1.1 RNAi 系统组成 [3] 上切割dsRNA，产生siRNA 。 1.1.1.dsRNA 与siRNA 1.1.3.Argonatue 蛋白家族 dsRNA(double-stranded RNA Argonaute (AGO)：一类庞大的蛋 ),是一种病毒基因、人工转入基因、 白质家族，是组成RISCs 复合物的主 转座子等外源性基因随机整合到宿主 要成员。 细胞基因组内，并利用宿主细胞进行 转录时时产生的双链RNA，这些双链 RNA 被核酶切割为21~23nt 的RNA 片 段，即siRNA，诱导了mRNA 的特异性 [2] 降解 。 1.1.2.Dicer Dicer 是一种核糖核酸内切酶，属 于RNase III 家族中特异识别双链RNA 真核生物AGO 蛋白质主要包含四个结 反义链3’末端12bp处切断靶mRNA 链 构域：N 末端、PAZ 结构域、MID 结构 [7]。RISC 是一个搭载着不同siRNA 的 域和PIWI 结构域。 降解平台，对不同的靶mRNA 进行切割。 种系发生分析表明Argonaute 蛋 1.2.RNAi 机制 白家族可以分为Argonuate 亚族和 RNAi 的作用机制可以分为三个阶 PIW