广东地区吉富罗非鱼无乳链球菌病的流行情况与耐药性.pdfVIP

第40卷第 3期 水 产 学 报 Vo1．40．No．3 2016年 3月 JOURNALOFFISHERIES0FCHINA Mar．．2O16 文章编号：1000—0615(2016)03—0503—09 DOI：10．11964j／fc．20151210191 广东地区吉富罗非鱼无乳链球菌病的流行情况与耐药性 魏 顺 ， 张 泽 ， 李宇辉 ， 胡敏强 ， 余岸 艮， 张 华 ， 兰江风 ， 张 志。， 颜远义 ， 林 蠡 (1．华中农业大学水产学院，湖北 武汉 430070； 2．淡水水产健康养殖湖北协同创新中心，湖北武汉 430070； 3．广东省水生动物疫病预防控制中心，广东广州 510000) 摘要 ：为了调查广东省惠州、肇庆、珠海、湛江4个吉富罗非鱼主养 区链球菌病的流行 情况和耐药性，并进一步分析D一内酰胺酶基因与青霉素类药物的耐药性关系。本实验通 过传统的方法对菌株进行分离纯化，扩增特异性基因cfb以及16srDNA对各菌株进行鉴 定；采用k-b法测定分离菌株的药物敏感性；通过PCR检测p一内酰胺酶类基因在分离菌株 中的分布情况，并用Statistic6．0统计分析各p一内酰胺酶基因与青霉素类药物的耐药关系。 实验结果表明，吉富罗非鱼无乳链球菌的阳性率从高到低的顺序为惠州(46．46％)湛江 (43．24％)肇庆(17．30％)珠海(4．17％)；药敏结果显示各地区无乳链球菌分离株对青霉素 (耐药率为94．29％)和磺胺二甲基嘧啶(耐药率为86．40％)普遍耐药，对恩诺沙星最为敏感 (耐药率为3．99％)；p-内酰胺酶基因分布与细菌耐药性统计结果显示，无乳链球菌基 因组 中的9个p一内酰胺酶基 因在各分离菌株中的分布呈高度多态性，其中SAG0658基因与氨苄 青霉素抗性显著相关，提示SAG0658基 因在无乳链球菌耐氨苄青霉素过程中发挥主要作 用；此外，9个p-内酰胺酶基因与青霉素抗性无相关性，说 明其在菌株对青霉素耐药过 程中并未发挥明显作用，提示分离菌株对青霉素的耐药性可能依赖其他途径。 关键词：吉富罗非鱼；无乳链球菌；药敏实验 ；耐药基因 中图分类号：Q935；S941 文献标志码：A 罗非鱼是世界粮农组织重点推介 的养殖鱼 肿、鳃部充血、胸鳍基部充血及腹水等[3]。 类 ，也是我 国重要 的养殖 品种。经过几十年 的 由于链球菌含有荚膜多糖，难以被宿主巨噬 养殖 ，其养殖规模不断扩大，密度不断增加， 细胞吞噬清除4【]。在生产中抗生素常被用来防治 加上种质退化、环境污染等因素，导致在养殖 罗非鱼链球菌病 ，但水产品中的含药量显示我 过程 中常会 出现疾病 。其 中罗非鱼链球菌病是 国抗生素存在过度使用的问题 5]『，抗生素的频繁 罗非鱼养殖 中最为常见 的一种疾病 ，该病给我 使用除了引起鱼体 内药物残 留的食 品安全 问题 国罗非鱼养殖业造成了巨大的经济损失。据报 外 ，也导致 了野生菌株对抗生素产生耐药性， 道 ，2009—2011年 ，罗非鱼链球菌病持续暴 使得对该疾病 的防控工作更为困难 。抗生素的 发，死亡率高达90％ 1『，每年因该病导致的经济 抗菌机制有多种 ，以青霉素为例 ，其化学机构 损失达20多亿元 ]。罗非鱼链球菌病发病高峰期 中含有B．内酰胺环，能够通过抑制细菌肽聚糖的 为7—9月，发病水温在25～37。c，患病鱼体主要 合成 ，破坏细菌细胞壁的完整性，使水分可渗 症状为眼球 凸出和 白浊 、游泳打旋、肛 门红 入菌体 ，从而导致菌体肿胀破裂 】。一方面13．内 收稿日期 ：2015．12—08 修