α7胆碱能受体激动剂PNU刺激SD大鼠星形胶质细胞钙调蛋白的表达.pdfVIP

第42卷 第1期 贵 州 医 科 大 学 学 报 Voi．42 No．1 2017年 1月 JOURNAL OFGUIZHOU MEDICALUNIVERSITY 2017．1 7胆碱能受体激动剂 PNU刺激 SD大鼠星形胶质细 胞钙调蛋 白的表达水 何 婧 一，任真奎 ，官志忠 ，。，禹文峰 一 ，吴昌学 一 (1．贵州医科大学 分子生物学重点实验室，贵州 贵阳 550004；2．贵州医科大学 地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室，贵州 贵阳 550004；3．贵州医科大学病理学教研室，贵州 贵阳 55OOO4) [摘 要]目的：探讨 胆碱能受体(R7nAChRs)激动剂(PNU)对SD大鼠星形胶质细胞钙调蛋白(CaM)表 达水平的影响。方法：将培养第3～4代的星形胶质细胞分为对照组、PNU处理组(PNU组)、a7nAChRs阻断剂 (MLA)联合PNU处理组(联合组)；对照组不加PNU和MLA处理，PNU组以1、5及 10 moL／L的PNU处理星形 胶质细胞6、12、18及24h，联合组以0．05、0．1及0．15 moL／L浓度的MLA预先处理星形胶质细胞2h后 ，选择 加人上调CaM蛋白表达水平最高的PNU浓度和最佳时间(PNU组筛选后所得)处理细胞；运用蛋白印迹 (west- 唧 blotting)方法检测3组星形胶质细胞 CaM的蛋白表达水平。结果：与对照组比较 ，1、5及 10I~mol／LPNU刺 激星形胶质细胞6、12、18及24h可使 CaM蛋白表达水平升高(P0．05)；加入5 moL／LPNU培养 12h后，上 调作用最明显；联合组(0．05、0．1及0．15 moL／L的MLA预先处理星形胶质细胞2h后 ，再加入 PNU5 moL／L 培养 12h)与PNU组比较，星形胶质细胞裂解液中CaM蛋白的表达受到抑制，差异有统计学意义 (P0．05)。 结论：PNU激活星形胶质细胞后可提高CaM的蛋白表达水平，MLA可阻断该表达。 [关键词]星形胶质细胞； 胆碱能受体；激动剂；钙调蛋白；阿尔茨海默病 [中图分类号]R34—33；R749．16 [文献标识码]A [文章编号]1000-2707(2017)01-0007-04 DOI：10．19367／j．cnki．1000-2707．2017．01．002 CalmodulinProteinExpressionafterActivationofotlpha7Nicotinic ReceptorActivatortoAstrocytesinSD Rats HEJing ，RENZhenkui ，GUAN Zhizhong， ，YUWenfeng ，WUChangxue’ (J．KeyLaboratoryofMolecularBiology，GukhouMedicalUniversty，Gu@ang550004，Gu~hou，China；2，TheKeyLaboratory ofEndemicandEthnciDiseases，Gu~houMedicalUniversity，MinsitryofEducationofP．R．China，Guiyang550004， Guizhou，China；3．DepartmentofPathology，GuizhouMedicalUniversty，Guiyang550004，Guhhou，China) [Abstract]Objective：ToDetecttheinfluenceofo7【cholinergicreceptor(or7nAChRs)PNUon calmodulin(CaM)expression1evelinSDratastrocytes．Methods：The3—4generationsofastrocytes weredividedintoPNUtreatmentgroup(groupP)，a7nAChRsblockingagent(MLA)combinedwith PNUtreatmentgroup(rgoupMP)，andnormalcontrolgroup(groupC)．GroupCdidnotreeeive