蛋白酪氨酸激酶——前景光明的肿瘤诊断和防治新靶点.pdfVIP

JWA基因应答环境应激的分子基础 陈瑞，顾灯安，刘祖龙，李爱萍，周建伟· 目的：氧化应激是许多化学物造成细胞损伤的直接或间接方式，其造成的DNA损伤与多种重要疾 病包括癌症的发生有关。JWA是新的环境应答基因，不仅能够快速并有效参与细胞应答多种环境应 激，如热应激，氧化应激，而且能够应答苯并(a)芘对细胞的作用。多环芳烃类化学物苯并(a) 芘通常经芳烃类受体及其相关的信号通路调节靶基因的表达。JWA通过何种机制应答苯并(a)芘 的作用尚不清楚。本研究旨在探讨JWA应答氧化应激和苯并(a)芘等环境应激的分子基础。方法：先 用数种细胞株建立了过氧化氢口209和苯并(a)芘所致的细胞损伤模型，了解JWA基因在细胞应答环 境应激过程中的表达变化规律；在此基础上分别用SOD和过氧化氢酶处理咀进一步了解两种环境 应激所引起的细胞内超氧阴离子和胞内过氧化氢的变化规律；为进一步探讨JWA是如何应答氧化 应激的，构建了含JWA启动子不同部位的系列报告基因，比较不同片段的转录活性；综合运用 晟后用关闭JWA基因的细胞株证实JWA是细胞应答过氧化氢和苯并(a)芘的重要分子。结果： 发现氧化应激可诱导JWA基因高表达，并呈现明显的时间一、剂量一效应关系；用过氧化氢和苯 并(a)芘处理细胞后胞内过氧化氢水平明显增加；JWA启动子对过氧化氢和苯并(a)芘刺激表现山 很强的转录活性；在JWA启动子．58A28 bp区域两个CCAAT反应元件中的一个CCAAT元件可与 过氧化氢和苯并(a)芘作用后产生的核转录因子NFI特异性结合，从而调节JWA基因表达，应答两 者造成的DNA氧化损伤。结论：本研究首次阐明JWA作为新的环境应答基因应答细胞氧化应激的 分子基础，提示JWA参与细胞内ROS有关的DNA损伤修复信号通路。 关键词：JWA，氧化应激，信号转导 蛋白酪氨酸激酶 ——前景光明的肿瘤诊断和防治新靶点 单保恩 (河北医科大学第四医院科研中心舸北省肿瘤基因诊断、预防和治疗重点实验室，石家庄050011) 细胞信号转导是指信号分子从一种形式转换成另一种形式来传递信号，使细胞外信号被转换成 胞内的生化事件，最后使信号进入细胞核，引起基因的转录和表达，来完成细胞对外界环境刺激所 产生的相应反应。细胞信号转导系统由接收信号的受体(膜受体和核受体)、受体后的信号转导通路 和信号的生物学效应等组成。信号转导的主要途径包括：1．酪氨酸蛋白激酶介导的信号转导途径： 激酶或磷酸酶使信号分子加上或移去磷酸基团(蛋白质的磷酸化和脱磷酸化)，改变下游系列蛋白质 37 orGproteins) 作为“开关”的某种细胞活动与另外一些同样需要GTP结合蛋白参与调控的细胞活动过程相偶。3． 鸟苛酸环化酶信号转导途径。4．核受体及其信号转导途径。蛋白质某些氨基酸残基上的氢原子在蛋 白激酶作用卜-被ATP释放的磷酸根取代而发生磷酸化。然而，加上去的磷酸基因也能够由蛋白磷酸 酶除去发生脱磷酸化。磷酸化和脱磷酸化是一个可以相互转化的过程。磷酸化激活的底物，去磷酸 化则可使它失活，反过来也一样。 蛋白激酶 一 蛋白质-oH+ATP—————————蛋白质-P042。+ADP kinase protein 蛋白磷酸酶 H20+蛋白质．P042-——————————◆蛋白质-0H·HO-P042 proteinphosphatasev 发生磷酸化的氨基酸残基有酪氨酸、丝／苏氨酸和组氨酸。免疫细胞只涉及前两类氨基酸，由蛋 kinase，PTK)和丝／苏氨酸激酶催化完成。蛋白酪氨酸激酶(PTK) 闩酪氮酸激酶(protein—tyrosine 是专一性使蛋白质上酪氨酸残基发生磷酸化的蛋白酶。主要活跃在信号转导的启始和上游阶段，调 节细胞的增殖、分化和死亡等