γ-氨基丁酸及其受体调控CD8^＋T细胞活化.pdfVIP

第 8卷 第2期 器官移植 VO1．8NO．2 2017年 3月 OrganTransplantation Mar．2017 · 实验 研 究 · ^y一氨基丁酸及其受体调控CD8+T细胞活化 樊丈梅 高钰 孙玉洁 马锡慧 何秀云 肖漓 石炳毅 摘【要】 目的 探讨Jy．氨基丁酸(GARA)及受体对CD8+T细胞增殖能力的影响。方法 采用CD8q细胞磁珠 分选试剂盒分选 Balb／c小 鼠脾脏的CD8叮细胞 ；在CD3／CD28活化磁珠 的作用下，以不同浓度的GABA刺激 CD8ff细胞，通过5．溴脱氧尿苷 (B删 )标记和流式细胞术检测cD8十]r细胞的增殖情况；通过实时荧光定量聚合酶 链反应(PCR)比较CD8+T细胞活化前后GABA-A、GABAB受体的表达。结果 流式检测结果显示 ，GABA可抑制 已活化的CD8~F细胞的增殖，表现为CD152~CD8 细胞明显减少 ；实时荧光定量 PCR结果显示 ，仅在CD8~I细 胞活化时表达的GABA-A受体亚型为 、o6【和GABA．B受体亚型为 la；CD8+T细胞活化后有明显增加的GABA．A 受体亚型有 、0t、13、31、．y、：和0，而GABA．B2R和GABA-Blb则在活化前和活化后均无表达。结论 GABA可 抑制已活化的CD8~T细胞的增殖，其活化受GABA相关受体所调节，但其具体机制还有待于进一步探讨。 【关键词】CD8+T细胞；CD3／CD28； ．氨基丁酸；移植免疫；GABA-A受体；GABA．B受体；细胞增殖； T细胞活化；CD152 【中图分类号】R617，R392．4 文【献标志码】A 【文章编号2017)02．0010．05 of oeIl8捌 皿 ao mdits联呻 FanWenmei,GaoYu，SunYujie,MaXihui,HeXiuyun， XiaoLtShiB面霉 ．OrganTransplantInstituteofPeople’SLiberationArmy,the309 HospitalofPeople’SLiberationArmy,Beijing 100091，China Correspondingauthors：ShiBi．gyi,Email：shibingyi@medmail．corn．o11 XiaoLi,Email：xiaoli1972@163．CO／r／ A【l柚瞳。t】．)t∞由0Toevaluatetheeffectof-aminobutyricacid(Q A)anditsreceptorsuponhteproliferation ofCD8+Tcells． 嘲hOdlThesplenicCD8 cellsofBalb／cmicewereobtainedbyCD8qcellmagneticbeadsortingkit． Underhte effectofCD3／CD28一activatedmagneticbead ，CD8~T cellswere stimulatedby differentconcentrationsof GABA．5-bromo-2-deoxyuridine03rdLOlabelingandflowcytometrywereperformedtodetecthteproliferationofCD8~T cells．TlleexpressionlevelsofGABA-A nadGABA-B receptorbeforena dafterCD8+Tcellactivationwerecomparedby fluorescentqunatitativereal-timepolymerasechainreaction