禽呼肠孤病毒σ2基因的克隆和表达.pdfVIP

家禽传染病 3讨论 MDV感染鸡体后。先表现生产性感染(溶细胞感染)。产生有囊膜的完整病毒(完全生产性感染)和 无囊膜的病毒(限制生产性感染)。感染七天后，病毒开始进入潜伏感染阶段．此时，病毒基因组处于休 眠状态，不拷贝，不表达。感染三周后，进入第三阶段即转化感染阶段，在该阶段MDV表现第二次溶细 胞感染和MDV基因与鸡体内淋巴细胞核酸的重组，进而使淋巴细胞肿瘤化。MDV强毒可进一步表现转 化感染：非致瘤MDV在鸡体内仅表现生产性感染和潜伏感染阶段，而且病毒从生产性感染进入潜伏感染， 这种潜伏状态在无外界因素刺激情况下，不会解除，一直保持I，…。 鸡体在第一次(一般在1日龄)接种IvlD疫苗后，病毒从生产性感染进入潜伏性感染，此时免疫鸡获 得一定的抗肿瘤免疫力，再次接种klD疫苗毒(血清型相同或不同)，接种的疫苗毒也从生产性感染开始 增殖，再经过一段时间后也转为潜伏感染。再次接种疫苗毒的生产性感染，在第一次免疫记忆存在的条件 4下，使免疫鸡群受到了再一次大量免疫原的刺激，从而获得了更强的体液和细胞介导的免疫应答，大大增 强了鸡体的抗肿瘤免疫力例。 目前，虽然有人对MD疫苗二次免疫表示赞同，但依然不能对此作出科学的解释，说明现有的IVlD免 疫学理论是不完善的或需要修正。根据最近几年国内外对lVID致病机理和免疫机理研究的最新成果，我们 通过用1型和3型MD疫苗来免疫有MD母源抗体的狼山鸡，然后检测各免疫组外周血单核细胞表面MDV 相关抗原的表达情况。证实了MD疫苗二次免疫疫苗毒在免疫鸡体内能成功地产生生产性感染。一次免疫 MD疫苗在免疫后7天左右生产性感染达到高峰，随后下降并维持一较低水平，此时进入潜伏感染阶段； 而IvID疫苗二次免疫，在第一次免疫后7天左右生产性感染达到高峰，随后进入潜伏感染，在第二次免疫 后7天左右又产生生产性感染并达到高峰，随后又下降并维持潜伏感染。 MDV强毒在体内的感染分为四个阶段，即：早期的溶细胞感染(生产性感染)．潜伏感染，第二次溶 细胞感染和肿瘤细胞增生期。而非致瘤MDV在鸡体内仅表现生产性感染阶段和潜伏感染阶段。因此，我 们有理由相信，鸡体在第一次(一般在1日龄)接种MD疫苗毒后，病毒从生产性感染进入潜伏感染。此 时，免疫鸡群获得一定的抗肿瘤免疫力。当再次接种MD疫苗毒时，新接种的疫苗毒也从生产性感染开始 增殖，然而由于第一次免疫记忆的存在从而使鸡获得了更强的体液和细胞介导的免疫应答，从而增强了机 体的抗肿瘤能力。 参考文献略 禽呼肠孤病毒oz基因的克隆和表达 邓显丈，谢芝勋·，刘加波，庞耀珊，唐小飞 (广西兽医研究所，广西 南宁 530001) 摘要：采用RT-PCR技术扩增禽呼肠孤病毒ARVS1133毒株和广西分离株R1的02基因，将啦基 构建好的重组质粒。经l RI．02的分子量为65．1 生特异性反应，表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性． 关键词：禽呼肠孤病毒：02基因；表达；PGEX-4T-I。 禽呼肠孤病毒(ARV)广泛存在于世界范围内的商品肉鸡群中．可感染鸡、火鸡及一些鸟类【ll，临床 第六次全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 上主要引起鸡关节炎，腱鞘炎、吸收障碍综合症、矮小综合症和呼吸道病等多种疾病，造成很大的经济损失 II,21。 的特异性中和反应的表面抗原，能刺激机体产生保护性的中和抗体m”，该蛋白还是一种细胞吸附的特异 壳蛋白之一，拥有367个氨基酸．携带有群特异型中和抗原决定簇。02通过03作用，提高感染细胞上的能 蛋白的基因克隆到表达载体，在大肠杆菌中进行表达。并鉴定了表达的蛋白，现将结果报告如下： 1材料与方法 1．1菌株和质粒 ‘ ARV PGEX-4T-1细菌表达载体购自Promega公司。 1．2主要酶与试剂 I、Xho TaqDNA聚合酶、RT-PCR试剂盒和限制性内切酶EcoRI购自大连宝生物公司。MxDNA／EeoR l+Hind Marker，低分子量蛋白Maker，T4 和Trizol抽提