玉米转录因子abp9基因的bac克隆鉴定及染色体定位-生物技术进展.pdfVIP

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2017-11-11 发布于天津
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玉米转录因子abp9基因的bac克隆鉴定及染色体定位-生物技术进展.pdf

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生物技术进展２０１６年　第６卷　第６期　４３５~４４２研究论文ＣｕｒｒｅｎｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ＩＳＳＮ２０９５￣２３４１Ａｒｔｉｃｌｅｓ玉米转录因子ＡＢＰ９基因的ＢＡＣ克隆鉴定及染色体定位１２１２１∗ 蒲妍君 ꎬ　袁　静 ꎬ　庞军玲 ꎬ　韩方普 ꎬ　赵　军１.中国农业科学院生物技术研究所ꎬ北京１０００８１ꎻ ２.中国科学院遗传与发育生物学研究所ꎬ北京１００１０１摘　要: 为得到玉米转录因子ＡＢＰ９的准确基因组序列及其旁侧基因组序列ꎬ应用ＰＣＲ法对玉米自交系齐３１９ＢＡＣ文库中含有ＡＢＰ９基因的单克隆进行筛选ꎬ得到了１９个一级阳性混池ꎬ从中选择ＢＡＣ￣１０３、ＢＡＣ￣１５９进一步筛选获得了４个阳性单克隆ꎮ 以其中１个阳性单克隆ＢＡＣ￣１０３￣Ｃ３为模板进行全序列测定ꎬ比对分析后将ＡＢＰ９基因初定位于玉米自交系Ｍｏ１７基因组的３号染色体上ꎮ 另以玉米自交系齐３１９、自交系Ｍｏ１７萌发种子的根尖染色体滴片为材料ꎬ以绿色荧光标记的ＡＢＰ９基因ＯＲＦ区质粒ＤＮＡ为探针进行荧光原位杂交ꎬ确认在这２个自交系中ＡＢＰ９基因定位于３号染色体上ꎮ ＡＢＰ９基因组序列的获得及其染色体定位为该基因分子标记的开发及应用于分子育种奠定了基础ꎮ 关键词:ＡＢＰ９基因ꎻＢＡＣ文库ꎻ染色体定位ꎻ荧光原位杂交ꎻ分子育种ＤＯＩ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.２０９５￣２３４１.２０１６.０６.０８ＢＡＣＣｌｏｎｅＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄＣｈｒｏｍｏｓｏｍａｌＬｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＭａｉｚｅＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎＦａｃｔｏｒＡＢＰ９１２１２１∗ ＰＵＹａｎ￣ｊｕｎ ꎬＹＵＡＮＪｉｎｇ ꎬＰＡＮＧＪｕｎ￣ｌｉｎｇ ꎬＨＡＮＦａｎｇ￣ｐｕ ꎬＺＨＡＯＪｕｎ１.ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅꎬＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＢｅｉｊｉｎｇ１０００８１ꎬＣｈｉｎａꎻ ２.ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＧｅｎｅｔｉｃｓａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌＢｉｏｌｏｇｙꎬＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＢｅｉｊｉｎｇ１００１０１ꎬＣｈｉｎａＡｂｓｔｒａｃｔ:ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｏｂｔａｉｎｔｈｅａｃｃｕｒａｔｅｇｅｎｏｍｉｃｓｅｑｕｅｎｃｅａｎｄｉｔｓｆｌａｎｋｉｎｇｇｅｎｏｍｉｃｓｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆｍａｉｚｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒＡＢＰ９ꎬＰＣＲｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｓｃｒｅｅｎｔｈｅＢＡＣｌｉｂｒａｒｙｏｆｍａｉｚｅｉｎｂｒｅｄｌｉｎｅＱｉ３１９ｆｏｒｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｓｉｎｇｌｅＢＡＣｓｗｈｉｃｈｃｏｎｔａｉｎＡＢＰ９. ＡｓａｒｅｓｕｌｔꎬｆｏｕｒｐｏｓｉｔｉｖｅｓｉｎｇｌｅＢＡＣｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍｔｗｏｒａｎｄｏｍｌｙｓｅｌｅｃｔｅｄａｍｏｎｇ１９ｐｏｓｉｔｉｖｅｐｒｉｍａｒｙｐｏｏｌｓꎬ ｎａｍｅｌｙＢＡＣ￣１０３ꎬＢＡＣ￣１５９. ＢｙｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅａｌｉｇｎｍｅｎｔｏｆｓｉｎｇｌｅｃｌｏｎｅＢＡＣ￣１０３￣Ｃ３ｗｉｔｈＭｏ１７ｇｅｎｏｍｅꎬＡＢＰ９ｗａｓｍａｐｐｅｄｏｎｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ３ｏｆＭｏ１７.Ｔｈｉｓｒｅｓｕｌｔｗａｓｃｏｎｆｉｒｍｅｄｂｙｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎｕｓｉｎｇｇｒｅｅｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ￣ｌａｂｅｌｅｄＡＢＰ９ＯＲＦａ