环介导等温扩增技术在疾控机构微生物检测中的应用-海南医学.pdfVIP

Vol.23 No.1 January 2012 HAINANMEDICALJOURNAL 《海南医学》2012 年第23 卷第1 期 doi:10.3969/j.issn.1003-6350.2012.01.049 ·综 述· 环介导等温扩增技术在疾控机构微生物检测中的应用 唐海丰，熊鹿言，李 勇 （上海市普陀区疾病预防控制中心，上海 200333 ） 【摘要】 环介导等温扩增技术（LAMP ）是一种新型的体外等温扩增特异核酸片段的技术，具有特异性强、灵 敏度高、快速简便等优点。本文综述了近年来LAMP 在微生物检测领域的具体应用实例和研究进展，并对其应 用前景做了展望。 【关键词】 环介导等温扩增技术；微生物检测；应用 【中图分类号】 R446.5 【文献标识码】A 【文章编号】 1003—6350(2012)01—103—07 环介导等温扩增（Loop-mediated isothermal am- 酶，LAMP 还可以实现对 RNA 模板的扩增 [3] plification ，LAMP ）是2000 年由日本研究人员Notomi （RT-LAMP ）。 [1] 等发明的一种新型的体外核酸扩增技术 。该技术 LAMP 技术由于其特异性强，敏感性高，操作简 利用两对特殊引物和有链置换活性的Bst （Bacillus 便，产物易检测，不需昂贵设备和特殊试剂就能特异、 stearothermophilus）DNA 聚合酶，使反应中在模板两 高效、快速、简便地扩增靶序列等优点，自问世后短短 端引物结合处循环出现环状单链结构，在等温条件下 几年已在各领域得到广泛应用，目前国外已有较多的 使引物顺利与模板结合并进行链置换扩增反应。一 此类报道，并建立了专门的官方网站（http://loopamp. 9 10 般情况下，LAMP 可以在60 min 内扩增出10 ~10 倍 eiken.co.jp/lamp/index.html）。LAMP 在国内的应用 靶序列拷贝，得到浓度高达500 µg/ml 的DNA 。其扩 虽然起步较晚，但专家学者已在畜牧业、植物检疫、食 增产物既可以通过常规的荧光定量和电泳检测，也可 品安全、医学检验和传染性疾病检测等方面做了诸多 以通过简易的目测比色和焦磷酸镁浊度检测，还可以 研究，并不断对LAMP 技术进行改良使其更好地发挥 [4-9] 添加SYBR Green I、溴化乙锭（EB ）或其他核酸染色 作用 。本文就LAMP 在疾病预防控制机构病原微 [2] 剂进行显色后观察 。若在反应体系中加入逆转录 生物检测方面的应用作简单综述。 作者简介：唐海丰（1980—），男，江苏省大丰市人，主管检验师，学士。 培训如专题讲座、学习班等均需进行培训效果评估， 严格培训实施控制、加强培训效果评估，使员工的质 以了解培训是否达到了预定目标。评估的方法有培 量意识、服务意识、专业技术水平、工作效率等方面均 训前进行摸底考试、培训后进行理论考试或技能操作 有了很大的提高，从而促进了血站的整体进步，确保 [4] 考核、培训后对受训者行问卷调查、现场提问等 。 血站质量管理体系的有效运行和持续改进，保障临床 对于未达培训预期要求