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No.2
2011
China
No.227 Brewing
·116· Sedal Research
Report
甜蛋白Monellin在毕赤酵母中的表达及响应面法优化发酵培养基
徐爱才t,刘 军“z.,李鑫·,赵沁沁1
(武汉工业学院生物与制药工程学院,湖北武汉430023)
DesignExpert
的影响,结果表明酵母提取物、硫酸钙和磷酸缓冲液为3个主要因素:利用最陡爬坡法逼近最大响应区域;最后通过中心组合设计和
液(pH值为6.O)。在优化培养基条件下,工程菌生物量增加0.5倍,蛋白表达量提高近60%。
关键词:Monellin;基础盐培养基:毕赤酵母;响应面分析
中图分类号:Q93-335 文献标识码:A 文章编号:0254—5071(20”)02—0116-05
inPichia and offermentationmediumwith surface
ofMonellin
Expression pastorisoptimization Iesponso
XU
Aicail,LIUJunl甜,LIXinl,ZHAO
Qinqinl
430023,China)
University,Wuhan
toPiclna ofcAxIon Monellinwas andintracellularvector
Ab—ract:Accordingpastorispreference usage。single-strandgene synthesized expression
Wasconstructed.TherecombinantwaslincarizedwithSaclandtransformedintoGSl15swain was
pPICZA.Mon plasmid byelectropomtion.It
confirmedwitllPCRthatMonellinwas intothe andresultsofSDSindicatedthatMonellinwas after
gene integratedyeastgenome expressed
withmethan01.Saltmediumfor with surface software 7.0.Effect
induction P-pastorsw鹤optimizedr懿-ponse methodology(RSM)andDesignExpert
of ofinitialmediumwasstudiedwithPlackett-Burmaresultsshowedthat sulfateand
yeastextract,calcium
composition
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