酿造酱油米曲霉产中性蛋白酶提取与酶学性质研究-维普.pdfVIP

维普资讯 中 国 调 味 品 第 2期 CHINA CoNDIM ENT NO．2 2008年 2月 Feb．2008 酿造酱油米曲霉产中性蛋白酶提取与酶学性质研究 汤鸣强，郑挺，曾小芳，朱晓清 (福建师范大学 福清分校 生物与化学工程系，福建 福清 350300) 摘要 ：对米曲霉茵种F-81所产中性蛋白酶的提取及部分性质进行 了研究。结果表明：硫酸铵分 级沉淀的饱和浓度范围为4O ～8O ；该中性蛋白酶的最适作用温度为 6O℃，最适pH值为 7． 0。40℃ 下酶稳定性较好，6O℃ 下处理 20min，粗酶中几乎检测不到酶活力；中性蛋 白酶 pH稳 定范围为 6．O～8．0。Km值为 2．84mg／mL；最大反应速度 V 为0．32mg／(rain·mL)。Me 对酶活有激活作用，Cu抖、Fe什、Znz、Mn2不同程度抑制酶活性，其中Cuz、Fe件强烈抑制酶活 性 。 关键词 ：中性蛋 白酶；酶学性质 ；米曲霉 中图分类号：Q556．2 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000—9973(2008)02—0038—03 Studiesonextractionandpropertiesofneutralproteaseproducedby soyzymogenasperglIlusoryae TANG Ming—qiang，ZHENG Ting，ZENG Xiao—fang ，ZHU Xiao—qing (DepartmentofBiologyandChemistryEngineering，FuqingBranchofFujJan NormalUniversity，Fuqing350300，China) Abstract：Theextractionandpartialpropertiesofneutralproteaseproducedbysoyzymogen AspergillusoryaeF-81werestudied．Theresultswereshowedasfollowed：Theconcentra— tionrangeofammonium sulphateforenzymeprecipitationwas40 ～8O％；Theoptimum temperatureandpH forneutralproteasecatalysiswere60℃ and7．0，respectively．Theen— zymeremainedbetterstableunder40℃ ，whentreatedwith60℃ for20minutes，theactivity ofcrudeenzymecouldnotbedetected．ThestablerangeofpH forneutralproteasewas6．0 ～ 8．0．TheKm andV were2．84mg／mLand0．32mg／(min ·mL)，respectively．Mg stimulatedenzymeactivity，whileCu+，Fe。+，Zn+，M n+ inhibitedenzymeactivity to some differentextentamongwhichCu andFe件 hadstronginhibitionsonenzymeactivity． Keywords：neutralprotease；enzymologicalproperties；aspergillusoryae 中性蛋 白酶作用条件温和，是最早发现并广 碱性蛋白酶，稳定性高，能耐较高的温度；米曲霉 泛应用于工业化生产的蛋白酶制剂[1]，可应用于 也是美 国FDA公布的4O余种安全微生物菌种之