复方甘草酸苷抗大鼠溃疡性结肠炎作用机制探究.docVIP

复方甘草酸苷抗大鼠溃疡性结肠炎作用机制探究 　　[摘要] 目的 观察复方甘草酸苷对溃疡性结肠炎（UC）模型大鼠的治疗作用，探讨其治疗UC的可能作用机制。 方法 将50只大鼠随机分成正常组（0.9%氯化钠溶液）、模型组（0.9%氯化钠溶液）、阳性对照组[300 mg/（kg·d）美沙拉嗪溶液]、复方甘草酸苷低剂量组[12.5 mg/（kg·d）]和复方甘草酸苷高剂量组[50 mg/（kg·d）]。除正常组外，其余大鼠采用2，4，6-三硝基苯磺酸法制备UC大鼠模型。造模3 d后，各组按设计剂量灌胃给药10 d，处死大鼠取结肠黏膜组织。进行病理检查及评分，测定丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、髓过氧化物酶（MPO）的水平，并采用逆转录-聚合酶链反应法检测细胞间黏附因子-1（ICAM-1）基因表达变化。 结果 正常组、模型组、阳性对照组、复方甘草酸苷低剂量组和高剂量组病变评分依次为：（0.0±0.0）、（6.2±1.0）、（2.6±0.2）、（3.0±0.9）、（3.6±0.0）分；MDA含量依次为：（1.75±0.75）、（1.99±0.68）、（1.09±0.25）、（1.18±0.48）、（1.23±0.45）nmol/mgprot；SOD水平依次为：（97.19±13.27）、（85.25±24.88）、（70.00±12.61）、（65.19±24.51）、（78.03±19.77）U/mgprot；MPO水平依次为：（0.34±0.03）、（0.36±0.03）、（0.31±0.02）、（0.36±0.05）、（0.36±0.04）单位/克湿片；ICAM-1相对表达量依次为：（2.56±0.80）、（7.36±4.87）、（2.92±1.29）、（2.16±0.85）、（5.81±5.10）。与模型组相比，各治疗组结肠组织病变评分和MDA含量显著下降（P 0.05），但复方甘草酸苷高剂量组ICAM-1表达水平与模型组无显著变化（P 0.05）。 结论 复方甘草酸苷对UC有显著的治疗作用，机制可能与改善组织的病变程度，减轻或阻断组织的脂质过氧化反应，抑制结肠黏膜ICAM-1基因表达有关。 [关键词] 复方甘草酸苷；溃疡性结肠炎；丙二醛；超氧化物歧化酶；髓过氧化物酶；细胞间黏附因子-1；基因表达 [中图分类号] R259 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）07（c）-0024-04 复方甘草酸苷是以甘草中的活性物质-甘草酸（甘草甜素）为主要成分，辅以甘氨酸、半胱氨酸制成的胺盐制剂，具有抗炎、抗病毒、抗变态反应、免疫调节和类固醇样作用，临床上广泛应用于慢性肝病、银屑病、荨麻疹、斑秃、过敏性紫癜、溃疡性结肠炎（UC）等多种疾病的治疗[1]。本实验中观察复方甘草酸苷对实验性UC大鼠结肠组织病理改变，炎性损伤，丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、髓过氧化物酶（MPO）的含量变化及结肠黏膜细胞间黏附因子-1（in-tercellular adhesion molecule 1，ICAM-1）基因表达的变化，探讨复方甘草酸苷对UC的治疗作用及可能的机制。 1 仪器与试药 1.1 实验动物 50只雄性SD大鼠，SPF级，160～180 g，购自广东省医学实验动物中心，实验动物质量合格证明编号：0088509、0088823。 1.2 药物、试剂与仪器 2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）（美国Sigma公司，批号：021M5009）；美沙拉嗪控释颗粒（法国爱的发制药集团，批号：05490）；复方甘草酸苷（秋山片剂株式会社，批号10073A）。MDA、SOD、MPO测定试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号分别20110720；RT-PCR试剂盒（美国Invitrogen公司，批号；PCR扩增引物（上海英潍捷基贸易有限公司）；ICAM-1试剂（上海英潍捷基贸易有限公司）。生物组织全自动脱水机（TS-12N），生物组织包埋机及冷冻机（BM-VII），摊片烤片机（CS-VI），生物组织全自动染色机（RS-18），均是湖北孝感医用仪器有限公司；轮转切片机（德国Leica公司，RM2135），病理图像分析系统（日本奥林巴斯，BX41）；艾本德核酸蛋白测定仪（Eppendorf，BioPhotometer plus）等。 2 方法 2.1 模型的建立与分组 50只SD大鼠正常喂养，检疫5 d合格后，随机分为正常组、模型组、阳性对照组、复方甘草酸苷低剂量组和高剂量组，每组10只。除正常组不做任何处理外，其它组大鼠参照文献[2-3]采用TNBS灌肠法复制UC大鼠模型。造模3 d后，分