紫薇基因组DNA分离纯化.docVIP

紫薇基因组DNA分离纯化 　　摘 要： 利用改良CTAB法提取了紫薇叶片细胞基因组DNA，用琼脂糖凝胶电泳紫外分光光度计进行测定。结果显示，提取的DNA没有明显的降解，并有较高的浓度，纯度一般。获得的DNA可进一步用于后续分子生物学试验。 关键词：紫薇；DNA；改良CTAB法；提取；测定 中图分类号：Q936 文献标识码：A DOI编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2013.09.001 Isolation and Purification of the Genomic DNA from Lagerstroemia indica L. JIA Yong-ping1， YU Zhan-rong2， ZHANG Hong-mei3，5， SUN Yi4，5 （1.Baode Seed Management Station of Shanxi Province，Baode，Shanxi 036600，China；2.Xinzhou Seed Control Station of Shanxi Province，Xinzhou，Shanxi 034000，China；3.Maize Research Institute，Shanxi Academy of Agricultural Sciences，Xinzhou，Shanxi 034000，China；4.Biotechnology Research Center，Shanxi Academy of Agricultural Sciences，Taiyuan，Shanxi 030000，China；5.Key Laboratory of Crop Gene Resources and Germplasm Enhancement on Loess Plateau，Ministy of Agriculture，P.R.China，Taiyuan，Shanxi 030000，China） Abstract： In this study，the genomic DNA of Lagerstroemia indica L. was isolated using improved CTAB method.The determined results of agarose gel electrophoresis and ultraviolet spectrophotometer showed its good integrity，high concentration and well purity.The DNA extracted from Lagerstroemia indica L. could be used in further molecular experiment. Key words： Lagerstroemia indica L.；DNA；improved CTAB method；isolation； determination 紫薇（Lagerstroemia indica L.）又名百日红、满堂红、痒痒树，属于千屈菜科紫薇属[1]，是一种被广泛种植的观花树种，为徐州市市花。原产于亚洲东部温带地区，在东亚分布甚广，是我国夏季主要的园林绿化树种。紫薇属落叶灌木或小乔木，高可达7 m，树冠不整齐，树皮光滑，淡褐色，嫩枝四棱；叶对生，椭圆形至柜圆形，长3～7 cm；圆锥花序顶生，花有红色、紫色。研究表明，紫薇有很多的药效[2]。 植物DNA的提取和纯化是植物基因工程研究的基础操作，实施分子标记。基因文库构建、基因分离及其遗传转化和鉴定等都以提取DNA为前提。如何简捷有效地提取到纯净、合格的大分子双链DNA，一直是植物生物技术研究者关注的问题。植物细胞不同于动物细胞，除了具有细胞壁外，还含有大量的多糖、脂质、色素和酚类物质，给DNA的提取和纯化带来许多困难。提取植物DNA常用的试剂主要是CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）和SDS（十二烷基磺酸钠）[3-6]。CTAB和SDS都可以破坏植物细胞膜，以利于细胞内容物的释放。此外，CTAB可与核酸结合形成复合物，有利于将DNA与变性蛋白质及多糖分开、SDS可与蛋白质、多糖等形成复合物，经离心与DNA分开。 国内外学者对紫薇进行了栽培繁殖、引种、新品种选育、形态分类、进化、数量分类、生理生化特性、病虫害防治等方面的研究[7-10]，对于分子生物学方面的研究不多[11-12]。由于紫薇叶片内多酚及多糖等次生代谢物质含量高，叶片DNA提取也比较困难。为此，笔者以紫薇叶片为原材料，对紫薇基因组DNA进行提取和纯化，探索出一种高效提取纯化紫薇基因组DNA的试验方法，为后续