酪蛋白磷酸肽—无定形磷酸钙对牙本质粘接界面耐pH循环老化影响.docVIP

酪蛋白磷酸肽—无定形磷酸钙对牙本质粘接界面耐pH循环老化影响 　　[摘要] 目的 研究局部应用酪蛋白磷酸肽-无定形磷酸钙（CPP-ACP）对牙本质粘接界面耐pH循环老化的影响。 方法 常规制备牙本质粘接试件，将其随机分为3组，其中2组行pH循环，期间每日分别加用CPP-ACP、去离子蒸馏水（DDW）处理，15 d后测定微拉伸粘接强度，观察断裂模式、界面形貌及纳米渗漏，并确定混合层内元素含量。另一组试件制备完成后即刻测试。结果 无pH循环组及pH循环/CPP-ACP组微拉伸粘接强度差异无统计学意义，但二者均显著高于pH循环/DDW组（P 　　[Key words] casein phosphopeptide-amorphous calcium phosphate； resin-dentin bond； remineralization； bond strength； nanoleakage 口腔粘接技术奠定了口腔微创修复、美容修复的基础，已被广泛应用于口腔医学的各个分支领域，在现代牙科治疗中发挥不可替代的作用。尽管随着粘接技术的不断进步和粘接材料的更新换代，即刻粘接效果得到显著改善，然而由于牙本质结构的特殊性和口腔环境的复杂，牙本质粘接耐久性仍不尽人意。酸蚀剂脱矿程度和粘接树脂渗透能力不匹配以及亲水树脂单体比例过高等因素引起树脂向脱矿牙本质胶原网渗透不足，使混合层底部存在未完全被树脂包裹的裸露胶原，成为界面的薄弱区域[1]，易受到水、酶、细菌等因素影响而发生降解，破坏界面的完整和稳定，导致最终粘接失败[2-4]。在提高粘接耐久性的不断探索中，国内外学者提出了乙醇湿粘接技术[5]、抗菌粘接材料[6]、酶抑制剂[7]等众多措施，尽管能在一定程度上延缓粘接界面的老化，但由于裸露胶原未被封闭，因而胶原降解、粘接失败的风险依然存在。有学者[8-9]指出：如果能提供合适的再矿化条件，混合层底部的裸露胶原可以发生再矿化，以改善混合层质量，有助于提高粘接耐久性。 酪蛋白磷酸肽-无定形磷酸钙（casein phospho- peptide-amorphous calcium phosphate，CPP-ACP）是一种经典的再矿化活性物质[10-11]。大量研究[12-15]证实：局部应用CPP-ACP可抑制牙本质脱矿，并促进人工龋损处的再矿化。然而粘接后在界面区局部应用CPP-ACP是否对混合层局部裸露胶原亦有保护作用，促进其再矿化，增强界面薄弱区域而提高粘接耐久性，目前尚不明确。 本研究应用pH循环模拟日常进食过程中口内酸碱度的变化，旨在探讨粘接后局部应用CPP-ACP能否提高树脂-牙本质粘接界面耐pH循环老化的能力。 1 材料和方法 1.1 实验材料和器械 不含氟的护牙素（含10%CPP-ACP，GC公司， 日本），37%的磷酸凝胶（Vericom公司，韩国），牙 本质粘接剂（AdperTM Single Bond2，3M公司，美国），复合树脂（Filtekz250，3M公司，美国），硝酸银（上海科丰化学试剂有限公司）。 2.5%CPP-ACP溶液：护牙素与去离子蒸馏水（distilled and deionized water，DDW）以1∶3的比例振荡混匀备用；中性缓冲液[16]：用DDW溶解配制，含20 mmol·L-1羟乙基哌嗪乙磺酸、2.25 mmol·L-1 CaCl2·2H2O、130 mmol·L-1 KCl、1.5 mmol·L-1 KH2PO4，pH为7.0；酸性缓冲液[16]：50 mmol·L-1 CH3COOH、 2.25 mmol·L-1 CaCl2、130 mmol·L-1 KCl、1.5 mmol·L-1 KH2PO4，pH为5.0。 万能测试机（EZ test，Shimadzu公司，日本），体视显微镜（MLC-150，Motic公司，美国），场发射扫描电镜（field emission scanning electron microscopy，FE-SEM）、X线能谱仪（Hitachi公司，日本）。 1.2 样本制备 收集12颗新近拔除的无龋坏、完整的第三磨牙，浸泡于含有0.002%叠氮钠的4 ℃生理盐水中备用。采用慢速切割机在流水降温条件下垂直于牙长轴去除冠方釉质，暴露牙本质。牙本质表面采用600目碳化硅砂纸在流水下打磨30 s，超声清洗30 s后，气枪吹干，用37%的磷酸凝胶酸蚀15 s，流水冲洗30 s，湿棉球轻轻蘸干表面多余的水分，按说明书的使用方法涂布Single Bond2粘接剂并用棉棒搅动15 s，气枪轻吹10 s，按同样方法再涂布一层轻吹，光照固化10 s，分层堆塑Filtekz250复合树脂至4 mm厚度。