抑癌基因PTEN在大肠癌中表达和临床意义.docVIP

抑癌基因PTEN在大肠癌中表达和临床意义 　　[摘要] 目的 探讨抑癌基因PTEN在大肠癌中的表达及临床意义。 方法 采用免疫组化S-P法检测70例大肠癌组织中PTEN的表达，并探讨其与组织分化程度、淋巴结转移和Dukes分期等生物学行为的相关性。另选择30例癌旁正常大肠组织作对照组。 结果 70例大肠癌标本中PTEN阳性表达32例。30例癌旁正常组织中PTEN表达均阳性。大肠癌组织中PTEN的阳性率明显低于癌旁正常组织（χ2=26.27，P5 cm）作对照组，其中男17例，女13例；年龄38～87岁，平均（65.0±7.1）岁。两组患者在性别、年龄方面比较无明显统计学差异（P0.05），具有可比性。 1.2 免疫组化染色 采用免疫组化S-P法检测PTEN的表达。组织经10%福尔马林固定，石蜡常规包埋4 μm连续切片，进行HE染色和免疫组化S-P法染色。4 μm石蜡切片常规逐级脱蜡至水，3%H2O2室温孵育10 min，以阻断内源性过氧化物酶的活性，用微波抗原进行修复，滴加正常的羊血清封闭15 min，倾去血清滴加PTEN一抗工作液4℃过夜，后滴加生物素标记二抗工作液室温孵育15 min，再滴加辣根酶标记链霉卵白素室温孵育15 min。各步骤间PBS冲洗5 min×3次。常规DAB显色、复染、脱水、透明、封片和镜检。用已知阳性切片作阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。鼠抗人PTEN单克隆抗体为 Santa Cruz公司产品，免疫组化S-P试剂盒购自福州迈新公司，严格按照试剂盒说明书进行实验操作。 1.3 结果判定 免疫组化结果判断标准是以细胞浆见棕褐色颗粒者为阳性细胞。按照染色的有无及强度进行记分，其中0分为无色，1分为淡黄色，2分为棕黄色，3分为棕褐色；按照阳性染色细胞百分率记分，其中1分为11%～50%，2分为51%～75%，3分为75%，两项记分得分相乘结果3为（+），否则为（-）。 1.4 统计学处理 采用SPSS 17.0 for windows 统计学分析软件。计数资料结果以率[n（%）]表示，比较采用χ2检验，以P 　　近年来研究发现PTEN基因的突变或表达缺失与大肠癌的发生、发展和预后的关系密切。马颖等[12]研究发现PTEN在正常大肠组织、大肠腺瘤、大肠癌组织中的表达率分别为100%、70%和51.61%，呈逐级下降的趋势，统计学分析大肠癌中PTEN的表达率明显低于非癌组。推测PTEN蛋白的丢失大肠癌发生、发展过程中可能起重要作用。谷化平等[13]研究发现大肠癌组织中PTEN蛋白表达率明显低于大肠腺瘤和正常大肠黏膜组织，提示PTEN基因缺失或突变与大肠癌的发生和发展关系密切。本研究结果发现大肠癌组织中PTEN的表达率明显低于癌旁正常组织，与上述的研究报道相符，提示PTEN基因异常改变参与大肠癌的发生与发展过程，可成为大肠癌基因诊断的新靶点。近年来国内外的研究发现大肠癌组织中PTEN的表达与其生物学行为的关系较密切。张敬伟[14]研究发现大肠癌组织中PTEN蛋白的表达与其分化程度呈正相关，即癌组织的分化程度愈差，其表达水平愈弱；PTEN蛋白表达还与淋巴结转移、Dukes分期呈负相关。曲洪滨等[15]研究发现大肠癌组织中PTEN蛋白的表达与癌细胞的分化、临床分期及淋巴结转移等生物学行为密切相关。本研究结果发现大肠癌组织中PTEN表达与组织分化程度呈正相关，与淋巴结转移和Dukes分期呈负相关。提示PTEN基因不仅与大肠癌的发生发展关系密切，而且其表达水平与大肠癌的生物学行为具有明显相关性，参与大肠癌恶化演变、浸润和转移过程。 总之，PTEN基因异常改变参与大肠癌的发生与发展过程，其表达水平与大肠癌的生物学行为具有明显相关性，参与大肠癌恶化演变、浸润和转移过程，有望成为大肠癌基因诊断和治疗的新靶点。深入探讨PTEN基因在大肠癌中的作用机制及其与其他抑癌基因相互性，对阐明和阻断大肠癌浸润和转移的形成具有重要价值。 [参考文献] [1] Zhou XD，Lv NH. Epidemiology of colorectal cancer research[J]. Modern Digestion Intervention，2006，11（3）：149-151. [2] 何晓燕. 大肠癌中VEGF和PTEN的表达及意义[J]. 浙江创伤外科，2011，16（1）：16-18. [3] 马颖，杨向红，田保玲，等. 大肠肿瘤中PTEN和TGF-1表达及意义[J]. 中国组织化学与细胞化学杂志，2012，21（1）：53-56. [4] 郭丽丽，刘林蟠. 皮肤癌组织中PTEN与Fas蛋白的表达[J]. 郑州大学学报（医学版），2008，43（2）：217