2型猪链球菌菌毛结构亚蛋白tSSU0473的原核表达与免疫学特性研究.pdfVIP

生 技 术 通 讯 … ． LEIERSINBIOTECHN0L0GY Vol2z·4斗～INO．O一·Nov．,Z…UI3j 753 ，rr doi：10．3969~．issn．1009—0002．2013．06．002 研究报告 2型猪链球 菌茵毛结构亚蛋 白tSSU0473的原核表达 与免 疫学特性研究 胡丹，张先云，耿美玲 ，张凤玉 ，郝丽娜，朱静，郑峰，潘秀珍 ，王长军 南京军区 军事医学研究所，江苏 南京 210002 [摘要] 目的：探究2型猪链球菌(S．suis2)强毒株05ZYH33的srtF基因簇编码 的菌毛结构亚蛋 白SSU0473的细菌定 位及其免疫保护效能。方法 ：原核表达截短的SSU0473(tSSU0473)，并 以亲和层析法纯化 目的蛋 白，Western印迹检 测tSSU0473蛋 白的免疫原性，ELISA法检测多抗血清 的效价及IgG亚型，小 鼠试验测试重组蛋 白的免疫保护效能，免 疫电镜观测tSSU0473蛋 白的细菌定位。结果：在原核系统中表达 了tSSU0473蛋 白；ELISA结果显示重组蛋 白能够刺 激小 鼠产生高效价 的免疫抗体 ；动物试验表 明tSSU0473蛋 白免疫小 鼠可抵御致死剂量病原体 的攻击，显示 出较好 的 免疫保护作用 ；免疫 电镜检测显示tSSU0473蛋 白定位于细菌表面 。结论 ：菌毛亚蛋 白tSSU0473是S．suis2膜表面蛋 白，具有 良好的免疫原性和免疫保护性，可作为S．suis2亚单位疫苗 的候选分子。研究结果为系统揭示S．s 2的菌毛 生物学结构与功能奠定 了基础。 [关键词] 2型猪链球菌；菌毛 ；SSU0473蛋 白；原核表达 ；免疫保护 [中图分类号] Q78；R392．1 [文献标识码] A [文章编号] 1009—0002(2013)06—0753—06 Prokaryotic Expression and ImmunologicalCharacterization ofPilus SubunittSSU0473 ofStreptococcussuisSerotype2 HU Dan，ZHANG Xian—Yun，GENG Mei—Ling，ZHANG Feng-Yu， HAO Li—Na，ZHU ring，ZHENG Feng, Ⅳ Xiu-Zhen，WANG Chang-Jun InstituteofMilitaryMedicalSciences，NanjingCommand，Nanjing210002，China Correspondingauthor，E-maih science2OO8@yah0o．con．en [Abstract]Objective：ToelucidatetheinmmunoprotectionofpilussubunitSSU0473encodedbythesrtFpilusis— land in the Chinese strain 05ZYH33 ofStreptococcus suis serotype 2(S．suis2)．M ethods：The truncated protein tSSU0473 was expressed in prokaryotic cells and was purified by affinity chromatography．Then recombinantpro— tein wasanalyzed by W estern blotting，and the anti-SSU0473 serum wasprepared by immunizing micewith reeom— binanttSSU0473 protein and analyzed by ELISA．Thelocation site oftSSU0447 protein in bacterium was detected by immune electron m