反义核酸抑制miR-20、miR-106表达对293T细胞增殖的影响.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(9)：1鱼鱼 l§ · 1665 · [文章编号] 1000-4718(2010)09—1665—05 · 论 著 · 反义核酸抑制 miR一20、miR一106表达 对 293T细胞增殖的影响水 李有杰 ， 张 帅 ， 高宗华 ， 张文娟 ， 谢书阳 ， 张鹏举 ， 姜安丽 (山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所 ，山东 济南250012； 滨州医学院医学分子遗传研究所，山东 烟台264003；烟台山医院血液科，山东 烟台246000) [摘 要] 目的：通过反义核酸技术抑制 miR一20、miR一106的表达，检测对 293T细胞增殖的影响。方法： 应用特异性针对 miR一20、miR一106的反义核酸转染 293T细胞 ，用形态学、流式细胞技术研究反义核酸对细胞增 殖的抑制作用 ，用定量PCR和 ELISA研究 miRNA和相关靶基因的表达。结果：研究发现反义核酸可有效抑制 miR一20和 miR一106的表达 ，并明显抑制293T细胞的增殖；研究还表明反义 miR一106可明显上调抑癌基因m 的表达。结论 ：反义核酸通过抑制 miRNA表达，上调抑癌基因舶 的表达，能明显抑制 293T细胞增殖。 [关键词] RNA，反义；miRNA；293T细胞；细胞增殖 ；基因表达 [中图分类号】 R394．3 [文献标识码】 A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．09．001 Inhibition of293T cellproliferationbyblockingmiR 一20andmiR 一106 expressionwith antisenseRNA LIYou—jie ，ZHANGShuai，GAOZong—hua，ZHANGWen—juan，XIEShu— yang，ZHANGPeng—jU ，JIANGAn—li CInstituteofBiochemistryandMolecularBiology，MedicalCollege，ShandongUniversity，Jinan250012，China；Institute ofMedicalMolecularGenetics，BinzhouMedicalUnivemity，Yantai246003，China；DepartmentofHematology，Yantasi— hanHospital，Yantai246000，China．E—ma il：jianganli@sdu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinhibit293TcellproliferationbyreducingmiR一20andmiR一106expressionwithanti— senseRNA．METHODS：AntisenseRNA (orantisenseoligonucleotides，ASO)specifictomiR一20andmiR一106was synthesized，andthe293T cellsweretreatedwiththeseantisenseRNA．Then，thecellproliferationderivedfrom suppres— sionofantisenseRNAwasstudiedbymicroscopyandfluorescence—activatedcellsorter．TheexpressionofmiRNAandits targetgeneRbwerenaalyzedbyreal—timePCR andELISA。respectively．RESULTS：OurresultsshowedthatASOcould inhibittheexpressionofmiR一20andmiR一106effectivelyandinhibit293