雅罗鱼亚科鱼类（鳡鱼、草鱼及赤眼鳟）的ISSR分子鉴定.pdf

第 29卷第 9期 水 产 科 学 Vo1．29NO．9 2010年 9月 FISHERIES SCIENCE Sep．2010 雅罗鱼亚科鱼类(鳃鱼、草鱼及赤眼鳟)的ISSR分子鉴定 韩晓磊，郁建峰 ，陆秀乡，许 璞，徐建荣 (常熟理工学院 生物与食品工程学院，江苏 常熟 215500) 摘 要：用 3个 ISSR引物对同为雅罗鱼亚科鱼类的鲢鱼、草鱼及赤眼鳟进行简单重复序列区问扩增 (ISSR)的遗传分析。试验发现：(1)3种鱼类的种间遗传相似度 以鳃鱼与草鱼之间最高 (O．7157)。鲸鱼 与赤眼鳟之间最低 (O．3041)；遗传分化系数(Gst)O．9，且鲸鱼与草鱼的遗传分化系数最大 (0．9806)； UPGMA系统树显示 3种鱼类分为 2支 ，鲸鱼与草鱼首先聚在一起 ，最后与赤眼鳟聚类 。(2)3个 引物 均具有种 的特异性扩增带。其中引物 ISSR8扩增的 1550bp和760bp带，引物 ISSR62扩增 的700bp 带，引物 ISSR76扩增的790bp带为赤眼鳟 的特异性谱带；引物 ISSR8扩增 的2000bp和 1875bp带， 引物 ISSR62扩增的 1380bp带，引物 ISSR76扩增的 1240bp与 520bp带为鲸鱼与草鱼的共有特异性 谱带 ；引物 ISSR8扩增的1190bp带为鲸鱼与赤眼鳟的共有特异性谱带；引物 ISSR8扩增的 1340bp与 i000bp，引物 ISSR76扩增的2000bp带为草鱼与赤眼鳟 的共有特异性谱带。结果表明，鲸鱼、草鱼及 赤眼鳟的遗传差异显著，分类地位至少在种的水平上 ，这与 3种鱼的形态分类在属的水平是一致 的，同 时揭示了蟪鱼与草鱼的亲缘关系较赤眼鳟与二者的亲缘关系近；找到了3个引物共 17条 ISSR种 内特 异性标记和种间共享标记 ，可用于分子辅助分类和种质鉴定 。 关键词：雅罗鱼亚科 ；ISSR；分子鉴定；亲缘关系；特征标记 中图分类号：Q755 文献标识码 ：A 文章编号：1003—1111(2O1o)09—0546—04 鲤科鱼类是一个较大的淡水鱼类类群，广泛分 以稳定性好 ，多态性高，试验操作简单 、快速等特点 布于欧亚大陆、非洲和北美，该类群生物多样性最 而广泛采用 。现已在生物的遗传多样性、群体遗传 大的地区在东亚和东南亚 ，雅罗鱼亚科是鲤科 的重 学、分类学及农牧业的遗传育种等研究中广泛的应 要组成部分，地理分布广泛，其 中许多种类是我 国 用，并且在植物属种间分子鉴定及杂种遗传分析中 重要的经济鱼类 ，也有许多种为我 国的特产种 取得较好的结果 ]。许 多研究结果表 明，用 ISSR 属L】]。鳃鱼 (Elopichthysbambusa)、草鱼 (CtP加一 技术研究杂交育种是一种十分有效的认定杂种优 pharyngodonidellus)及 赤 眼鳟 (Squaliobarbus 势的方法_9 ，笔者采用 ISSR分子标记技术，对鲸 curriculus)为雅罗鱼亚科的不同属 ，其经济价值一 鱼、草鱼及赤眼鳟进行属种间分子鉴别 ，为资源调 直得到广泛关注且存在着极大 的市场潜力 。近年 查和种质鉴定提供遗传理论依据。 来 ，由于国内外市场对水产品的需求不断增长，水 l 材料与方法 产业获得了长足的发展 ，特别是随着养殖产业规模 的扩大，对于鱼类新、特、优 品种 的需求也急剧增 1．1 材料 加。草鱼与赤眼鳟的成体形态特征差异甚微 ，虽然 鲢鱼与赤眼鳟样品于 2007年 5月取 自苏州常 鲢鱼与草鱼的成体形态特征差异较明显 ，但在仔鱼 熟市长江水产资源驯养保