鉴定甜玉米品种真伪及种子纯度的RAPD引物筛选.pdf

研究报告 李智军 等：鉴定甜玉米品种真伪及种子纯度的RAPD引物筛选 鉴定甜玉米品种真伪及种子纯度的RAPD引物筛选 李智军， 卢文佳。 李春艳， 郑锦荣 (广东省农科集团良种苗木中心， 广州 510640) 摘要：采用CTAB法从6个甜玉米品种 “正甜613”、“正甜38”、“粤甜3号”、“粤甜9号”、“粤甜 13号”及 “粤甜 lO号”的 发芽胚轴提取DNA，用120个 RAPD引物对其进行扩增比较分析，从中筛选到2个引物；SPS-A04和SiX3．E20，在6个品 种 中扩增出相互不同的谱带，因此可用这两个引物构建DNA指纹图谱区分这些品种，或鉴定品种的真伪性。另外，对其 中4个品种及其亲本进行 了RAPD分析，筛选到3个引物 ，其中引物SPS—E15可同时用于 “正甜613”、“正甜38”及 “粤 甜 13号”3个品种的种子纯度检测，SPS—F06和SiX3一F19则分别可用于 “正甜38”和 “粤甜 10号”的种子纯度鉴定。 关键词： 甜玉米；品种真伪 ；种子纯度；RAPD引物 中图分类号： S513 文献标志码： A 文‘章编号： 1001—4705(2010)40-0019-04 ScreeningofRAPD PrimersforVarietyIdentificationandSeed PurityTesti13SweetCorn LIZhi-jun，LUWen-jia，LIChun-yan，ZHENGJin-rong (SeedandSeedlingcen~e，GuangdongAcademyofAgriculturalSciences，Guangzhou510460，China) Abstract：In thisstudy，DNAswereisolatedwith CTAB methodfrom hypocotylsofsixsweetQOITIvaricries． ‘Zhengtian613’，‘Zhengtian38’，‘Yuetian No．3’，‘Yuefian No．9’，‘YuetianNo．13’and ‘YuetianNo． 10’．RAPD amplification profilesofthesevarietieswereanalyzedusing120 RAPD primers．twoprimers of which，SPS—A04 andSPS—E20wereofundto generatedifferentbandingpattern ineach varietyused，nad thereforethebanddatabyeitherofhtem couldbeusedasDNA fingerprinttodifferentiatethesevarieties，truht andfalseness．Furthermore，fourvarietiesand theirparentswerealso analyzedbyRAPD technique．Three RAPD primerswereselected，oneofthem，SIS—E 15couldbeused simultaneouslytotesttheseedpurityfor htreevarieties，‘Zhengtian613’，Z‘hengtian38’and ‘YuedanNo．13’，andprimerSSI —F06 andSSI—F19 couldbeutilizedofridenti~ing Z‘hengtian38’and Y‘uetianNo．10’．respectively． Keywords： sweetCOrn ；varietyidentification；seedpurity；RAPD primer 近年，随着甜玉米 (ZeamayesL．var．saccharata 种现代分析手段，已被公认具有多态性丰富、快速、用 Sturt)品种选育速度的加快，生产上使用的甜玉米品种 量少、灵敏度高等特点。因此，该技术已广泛应用于各 日益增多。由于多数甜玉米品种在性