莱克多巴胺单克隆抗体的研制及阻断elisa检测方法的建立-核农学报.pdfVIP

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2018-08-19 发布于天津
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莱克多巴胺单克隆抗体的研制及阻断elisa检测方法的建立-核农学报.pdf

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莱克多巴胺单克隆抗体的研制及阻断elisa检测方法的建立-核农学报

904 核农学报　2008 ,22 (6) :904～908 　　 J ournal of N uclear Agricultural Sciences ( ) 文章编号 2008 0690405 莱克多巴胺单克隆抗体的研制及阻断 EL ISA 检测方法的建立 1 1 2 1 1 张海棠　王自良　邓瑞广　钟　华　范国英 ( 1 河南科技学院动物科学学院 ,河南新乡　453003 ; 2 河南省动物免疫学重点实验室 ,河南郑州　450002) ( ) ( ) 摘　要 :用混合酸酐法将莱克多巴胺 RAC 偶联于牛血清白蛋白 BSA ,合成免疫原 BSARAC ,并用紫外 ( ) 和凝胶电泳鉴定 ;用 BSARAC 免疫 BalbC 小鼠,细胞融合技术建立抗 RAC 单克隆抗体 mAb 杂交瘤细 ( 胞株 ,体内诱生腹水法制备 RAC mAb 。应用 RAC mAb 研制 RAC 残留快速检测阻断 EL ISA 试剂盒 RAC Kit) ,并测定其性能。结果表明 ,BSARAC 偶联成功 ,分子结合比为 1 ∶245 ;筛选出 3 株杂交瘤细胞 ,其中最好的4D8 株的亲和常数 Ka 为 165 ×1010 Lmol 。RACKit 的标准曲线呈典型的 S 型 ,符合 4 参数 logit 曲线拟合 ,线性范围为 1～170μ μ μ gL ,灵敏度为 052 gL ,检测限为 1 gL ,饲料样、猪尿样的平均添加回收率分别为 911 %和 892 % , 平均批内和批间变异系数 15 % , 与多巴酚丁胺的交叉反应率为 223 % ,与其他化合物无交叉反应 ,RACKit 在 4 ℃可保存 180d 。关键词 :莱克多巴胺 ; 人工免疫原 ; 单克隆抗体 ; 阻断 EL ISA ; 快速检测试剂盒 GENERATION OF MONOCLONAL ANTIBODY AND DEVELOPMENT OF BLOCKING ELIS