共培养诱导人骨髓间充质干细胞的定向分化.pdfVIP

中 国 医 学 科 学 院 学 报 ACTA ACADEMIAE MEDICINAESINICAE · 论 著 · 共培养诱导人骨髓 间充质干细胞的定 向分化 陈国玲 ，肖 瑛 ，杜洋洋 ，刘艳丽2，刘执玉 ，张 晗 山东大学第二医院眼科，济南250033 山东大学医学院人体解剖与组织胚胎学研究所，济南250012 通信作者：张 晗 电话 ：0531电子邮件：eg16129@163．com 摘要：目的 探讨间接共培养体外诱导人骨髓间充质干细胞 (MSCs)向上皮样细胞定向分化的可行性。方法 消 化培养法获取人结膜上皮细胞，密度梯度离心法联合贴壁培养法培养MSCs，并对所培养的细胞进行免疫细胞化学鉴定。 将人MSCs和结膜上皮细胞进行非接触共培养，免疫细胞化学、RT．PCR、Westernblotting对分化细胞进行鉴定。结果 体 外培养的人MSCs阳性表达CD29，不表达CD34。结膜上皮细胞贴壁生长，呈不规则圆形，阳性表达细胞角蛋白4(CK4)。 MSCs与结膜上皮细胞共培养 10d后，大部分细胞呈不规则圆形外观，基因和蛋白水平均表达CK4。结论 与人结膜上皮 细胞体外非接触共培养可诱导人MSCs向上皮样细胞定向分化。 关键词：干细胞；细胞培养；上皮细胞；诱导 中图分类号：R318．18 文献标志码：A 文章编号：1000．503X(2013)06．0623—05 D0I：10．3881／j．issn．1000—503X．2013．06．007 DifferentiationofMesenchymalStem CellsInducedbyCo-cultureMethod CHENGuo—ling ，XIAO Ying ，DUYang．yang ，LIUYan—li，LIUZhi—yu ，ZHANG Han DepartmentofOphthalmology，theSecondHospitalofShandongUniversity，Jinan250033，China DepartmentofAnatomy，SchoolofMedicine，ShandongUniversity，Jinan250012，China Correspondingauthor：ZHANG Han Tel：0531E-mail：cgl6129@163．com ABSTRACT：0bjective Toinvestigatethepotentialdifferentiationofhumanmesenchymal stem cells fMSCs)intoepithelium．1ikecellsbyaninvitroCO．culturemethod．Methods Thehumanconjunctivalepitheli— umwasobtainedbydigestionwithdispase11，andtheMSCswereisolatedbydensitygradientcentrifugaliza— tion．Allcellswereidentifiedaccordingtotheirmorphologiesandcell-surfaceantigen profilesbyimmunocyto— chemicalanalysis．TheMSCsunderwentCO—culturewithconjunctivalepitheliuminthemannerwithoutcell-to·ceU