金银花苯丙氨酸解氨酶ljpal1抗体制备及酶联免疫吸附-药学学报.pdfVIP

金银花苯丙氨酸解氨酶ljpal1抗体制备及酶联免疫吸附-药学学报.pdf

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金银花苯丙氨酸解氨酶ljpal1抗体制备及酶联免疫吸附-药学学报

1498 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 20 13, 48 (9): 1498 1502 银花苯丙氨酸解氨酶 (LJPAL1) 抗体制备及酶联免疫吸附分析 1 1 1* 2 汪周勇 , 黄璐琦 , 袁 媛 , 王保民 (1. 中国中医科学院中药资源中心, 北京 100700; 2. 中国农业大学, 北京 100094) 摘要: 本文基于已有工作基础, 选择与金银花活性成分积累密切相关的苯丙氨酸解氨酶基因 LJPAL1 构建 原核表达载体, 并在大肠杆菌中进行诱导表达; 利用 3 个抗原位点分别合成多肽抗原, 并制备多克隆抗体 Anti- LJT-1 、Anti-LJT-2 和Anti-LJT-3; 利用蛋白质印迹法筛选抗体Anti-LJT-2, 初步建立了间接法ELISA 本研究结 果为进一步开展金银花化学质量快速评价试剂盒研究奠定基础 关键词: 化学质量评价; 功能基因; ELISA 中图分类号: R93 1 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870 (20 13) 09- 1498-05 Antibody preparation and enzyme linked immunosorbent assay of Lonicera jap onica phenylalnine ammonia lyase 1 1 1* 2 WANG Zhou-yong , HUANG Lu-qi , YUAN Yuan , WANG Bao-min (1. National Resource Center for Chinese Materia Medica, Chinese Ac ademy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China; 2. China Agriculture University, Beij ing 100094, China ) Abstract : The expression of phenylalnine ammonia lyase (LJPAL 1) is closely related to the content of active compounds in Lonicera j ap onica . In this paper, a prokaryotic expression vector is constructed and LJPAL 1 protein is expressed in E. coli. Three antigen sites were synthesized to peptide antigen and prepared polyclonal antibody of Anti-LJT-1, Anti-LJT-2 and Anti-LJT-3, separately. Antibody Anti-LJT-2 was screened using Western blotting. And indirect ELISA was built using Anti-LJT-2. The results of this study will be a base for honeysuckle chemical quality and evaluation kits.

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