食用菌母种的制作技术.pptVIP

实验一 食用菌母种的制作技术 母种制作技术 母种即一级菌种，多用试管作为容器，因此又称试管种。是第一次用孢子分离法、组织分离法或基内菌丝分离法获得的纯菌丝体及其经过转管扩大后的菌丝体。 一级菌种是菌种生产的基础，一级菌种质量的优劣，直接关系到二级菌种和三级菌种的质量，对食用菌生产产生根本的影响。 母种培养基是菌丝体生长繁殖的基础，不同食用菌菌丝体的生长发育对培养基营养成分的要求是不同的。 常用的母种培养基有： 1 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA），广泛用于多种食用菌母种的分离、培养和保藏； 2 玉米粉蔗糖培养基，适用于多种食用菌，特别是香菇、金针菇菌丝生长； 3 稻草浸汁培养基，适用于草菇菌丝生长； 4 马铃薯棉籽壳综合培养基，广泛用于培养和保藏多种食用菌母种。 1 了解食用菌母种及母种培养基的种类； 2 通过实验，使同学们掌握母种培养基的制作、消毒与灭菌，母种转接等操作技术和方法。  灭菌锅，玻璃漏斗，漏斗架，六层纱布，试管，烧杯，中长玻璃棒，水果刀，酒精灯，75%酒精消毒瓶及酒精棉球，镊子，接种钩或铲，恒温培养箱，超净工作台，电炉；  马铃薯，葡萄糖或蔗糖，琼脂; 试管种（平菇、香菇等） （一）培养基的制作 1．PDA培养基：  马铃薯（去皮） 200g 葡萄糖 20g  琼脂 18～20g 水 1000ml  要求各小组按配方配制所需用量，可2—3组合作配制 2. 配制方法 a 先将马铃薯洗净、去皮、挖掉芽眼，切成1cm见方的小块，称取适量； b 将称好的马铃薯放入大烧杯内，加水适量，放在电炉上煮沸后维持15～20min，至马铃薯熟而不烂。 c 用六层纱布过滤，由于马铃薯在煮沸过程中，有部分谁被蒸发掉，所以过滤后的马铃薯汁，应加水补足水分至初始体积。 d 将称号的琼脂加入马铃薯汁中，在电炉上用文火加热，直至琼脂完全融化。最后加入葡萄糖等可溶性物质，搅匀。补足水分。 e 分装试管，培养基配好后应趁热用漏斗分装试管，装入试管高度的1/5～1/4.分装时应注意不得使培养基沾在试管的口壁上,以防杂菌污染。剩余的培养基分装到三角烧瓶中灭菌。 f 将分装好的试管塞好塞子，7或9支扎成一把，灭菌。（若使用棉塞，外面应包一层防潮纸，在用线绳扎紧，防止灭菌时棉塞被冷凝水浸湿）  ? (1) 左手拿两支试管，一支为已经灭菌的斜面，另一支为已长好的菌种。右手拿接种钩(已在火焰上灼烧灭菌又冷却)，并同时用右手轻轻拔下两支试管的塞子。 (2) 将试管口通过火焰数次，并稍转动，以防环境中的微生物落入。 * * 食用菌学实验 中南民族大学工商学院实验教学中心环境与生物工程分中心 一 实验目的 二、实验材料 三、实验内容与方法 标记刻度 1．具体灭菌要求：1.1kg/cm2，121℃，保持20~30min。 2．操作过程  加水?装锅?盖盖?加热?当压力升为0.5kg/cm2时排  放冷空气?正式升压?保压（1.1kg/cm2，121℃，保持20- 30min）?停止加热?自然降压至零?排放余汽?开盖?取 出灭菌物品?趁热摆斜面?检验灭菌效果（32℃空白培养 48h） （二）灭菌 （三）接种和培养