东方蜜蜂微孢子虫孢子冷冻保存后对意蜂工蜂的侵染性.pdfVIP

33 东方蜜蜂微孢子虫孢子冷冻保存后对意蜂工蜂的侵染性 游信毅　叶坤婷　应碧华　苏欣　梁 勤　黄少康 （福建农林大学蜂学学院，福州　350002 ） 摘　要：东方蜜蜂微孢子虫是成年蜜蜂的重要传染性病原真菌。试验对10% 的甘油、乙二醇、二甲亚砜 及水在-80 ℃低温下冷冻保存东方蜜蜂微孢子虫孢子5个月后，孢子对意蜂工蜂的侵染性进行了考查。每只 初出房工蜂接种3 ×104个孢子，结果发现，接种后15天，各组的孢子量无显著差异 （P0 .05 ），产孢量为 3.05～4.13 ×107个/ 只。10%甘油和10%二甲亚砜2种保存孢子感染工蜂的22 d累计死亡率分别高达74%和68% ， 而水保存的累计死亡率仅12.5% 。所以得出结论，10%甘油和10%二甲亚砜是比水更好的孢子冷冻保护剂。 关键词：东方蜜蜂微孢子虫；冷冻保护剂；侵染；工蜂；意大利蜜蜂 中图分类号：S895　　　　文献标识码：A Infectivity of Nosema ceranae spore to worker honey bee (Apis mellifera ligustica) after cryopreservation You Xinyi ，Ye Kunting, Ying Bihua, Su Xing, Liang Qing, Huang Shaokang Abstract: better than water as cryopreservants, Key words: Nosema ceranae 低温冷冻保存是最广泛使用的细胞和微生物的 东方蜜蜂微孢子虫 （ ）最早由 Apis cerana 保存方法[7] ，在物种保存中有重要意义。在低温保 瑞典科学家Ingemar Fries在中华蜜蜂 （ [1] cerana ）体内发现 ，2005年，第1次在西方蜜蜂工 存中，常用不同的保护剂，以减轻冷冻对细胞的伤 [2] 害，如甘油，乙二醇，二甲基亚砜 （DMSO ）等。 蜂中发现 ，但东方蜜蜂微孢子虫侵染西方蜜蜂可 [3] McGowan[8]开展了保护剂对微孢子虫冷冻保存的研 追溯到20世纪90年代中期 。现在，东方蜜蜂微孢 子虫已广泛传播于世界各地的西方蜜蜂[4] ，而且逐 究。通过荧光染色法对冷冻保存的孢子活力进行了 N.apis 评价，结果认为，10%甘油保存的孢子活性比相同浓 渐取代了西方蜜蜂微孢子虫 （ ）成为西方蜜 [3-4] A. dorsata 度的DMSO 、乙二醇更好。然而，与染色法相比， 蜂上的主要孢子种类 ；大蜜蜂 （ ）、小 A. florea [5] Bumble bee [6] 生物测定孢子活力较为准确，并更具实用参考价值 蜜蜂 （ ） 和熊蜂 （ ） 上也发 现东方蜜蜂微孢子虫的感染。 的方法。因此，本试验对DMSO 、乙二醇、甘油等 基金项目：现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-45-KXJ7)。 作者简介：游信毅（1988.12-）男，汉族，硕士生，蜜蜂饲养与繁育。 通信作者：黄少康（1969-），博士，教授，研究方向：蜜蜂生理病理。E-mail：460963445@。 34 不同冷冻保护剂冷冻保存后的东方蜜蜂微孢子虫进 研磨均匀，用血球计数板计数孢子数。 行了侵染活性的生物测定，将孢子接种初出房意蜂 1.3.3　统计分析 工蜂，以评价低温冷冻保存对孢子活力的影响。 数据的方差分析用SPSS软件的LSD法检验。蜜 1　材