冷冻鲣鱼中产组胺菌的分离筛选及其生物学特性研究 study on isolation and biological characteristics of histamine-forming bacteria in frozen storage of raw skipjack tuna.pdfVIP

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2017-11-28 发布于上海
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冷冻鲣鱼中产组胺菌的分离筛选及其生物学特性研究 study on isolation and biological characteristics of histamine-forming bacteria in frozen storage of raw skipjack tuna

第12卷第8期中国食品学报 V01．12No．8 20 1 2年8月 ofChineseInstituteofFoodScienceand 01 2 Joumal Technology Aug．2 冷冻鲣鱼中产组胺菌的分离筛选及其生物学特性研究杨健1 吴祖芳p周秀锦2翁佩芳1 沈飚2 (1宁波大学海洋学院应用海洋生物技术教育部重点实验室浙江宁波315211 2舟山出入境检验检疫局浙江舟山316100) 摘要采用Actis’s鉴别培养基。初步筛选鲣鱼组织中的产组胺茵；结合高效液相色谱法分析初步分离菌株的 rDNA基因产组胺能力。研究温度和pH因素对产组胺茵生长以及组胺产生的影响。通过生理生化、形态和16S 序列分析鉴定产组胺茵。试验结果表明，分离得到两株产组胺茵，分别记为J2和J4。这两株茵在添加L一组氨酸的胰酶大豆肉汤里均能够产生组胺。菌株J2和J4最适生长温度均为30℃，最适pH分别为7和6。菌株J2和 J4产组胺的最适温度分别为25℃和30℃，最适pH均为5，在适宜的实验条件下组胺产生量最大值为12．47 mg／L。根据菌株的形态、生理生化、生长和产组胺特性以及16SrDNA基因序列分析，J2和J4均与蜡状芽孢杆茵(B∞iff琳ce陀W)的亲缘关系最近。关键词鲣鱼；产组胺茵；生理生化特性；16SrDNA序列分析文章编号1009—7848(2012)08—0025—07 鲣鱼(眈o￡订缸)，俗称为炸弹鱼，属鲈形总 1材料与方法目、金枪鱼亚目、金枪鱼科、鲣属，我国只产1种； 1．1 材料、试剂与设备鲣鱼罐头是我国某些沿海城市重要的出口水产加 1．1．1原料冷冻鲣鱼(捕捞于中国东海，捕捞后工品，畅销日本、欧洲等国家；自中国加入世界贸于一30℃下速冻，一18℃保藏)，浙江舟山企业提供易组织，出口量不断增加，然而其组胺含量超标， (2010年4月)。无菌袋包装、冷藏，于5h内运到一直是制约产品出口的主要瓶颈。因组胺含量超实验室，一18℃保藏，以备试验用。标而引起的中毒事件也时有发生【1。31。组胺主要是 1．1．2主要试剂组胺标准品，购自Sigma公司；水产品在贮藏或加工过程中体内组氨酸经内源性丹磺酰氯，购自ACROS公司；L一组氨酸和1，7一二或外源性微生物产生的脱羧酸酶降解后产生的，氨基庚烷，购自阿拉丁试剂公司；DNA聚合酶，购对产品品质(感官指标)劣化或人体有一定毒害的自大连宝生物公司；乙腈和甲醇，购自迪马公司；化学物质【4】。本文通过筛选培养基，并结合高效液色谱分析用试剂均为色谱纯级：其它试剂均为化相色谱法检测组胺，从鲣鱼鱼肉组织中分离产组学纯和分析纯级。胺微生物，研究菌株的生长和产组胺特性。根据产 1．1-3培养基1)初步筛选培养基：胰蛋白胨5 rDNA 组胺微生物的形态、生理生化特性和16S 5 g，酵母膏5g，L一组氨酸29，NaClg，琼脂15g，基因序列分析对菌种进行鉴定。本研究结果可为甲酚红0．2 000 6．5。 g，蒸1 mL，加热溶化，调pH 冷冻水产品中与组胺含量相关的质量安全控制提 2)组胺发酵培养基：L一组氨酸10g，大豆蛋白胨供重要依据。