荧光免疫层析法定量检测胃蛋白酶原及应用-期刊.pdfVIP

标记免疫分析与临床 2017年3月第 24卷第 3期 33l 荧光免疫层析法定量检测 胃蛋 白酶原及应用 姜 欣 ，康熙雄 ，吕传 臣 ，王文艳 (1．首都医科大学附属北京天坛 医院检验科，北京 100050；2．北京新兴四寰生物技术有限公司，北京 102600； 3．中国中医科学院针灸医院，北京 100700) 摘要：目的 建立一种一次操作即可同时定量检测 胃蛋白酶原 I及 胃蛋白酶原 Ⅱ荧光免疫层析的方法，检测人血清 中胃 蛋白酶原 I(PGI)及 胃蛋白酶原 Ⅱ(PGII)的含量 ，用于辅助诊断慢性萎缩性 胃炎和早期胃癌。方法 将 鼠抗 胃蛋白酶 原 I(PGI)抗体用划线机喷到硝酸纤维素膜表面作为检测线 1(T1)，将鼠抗胃蛋白酶原 Ⅱ(PG1I)抗体用划线机喷到硝 酸纤维素膜表面作为检测线2( )，将羊抗兔 IgG多克隆抗体喷到硝酸纤维素膜表面作为质控线(C)；用荧光素分别标记 鼠抗 胃蛋 白酶原 I(PGI)抗体 、鼠抗胃蛋白酶原 Ⅱ(PGH)抗体和兔 IgG抗体，将所制得的以上三种抗体荧光素标记物按 一 定比例混合，均匀喷到玻璃纤维素膜上制得荧光标记物垫；以双抗体夹心法反应模式制备同时定量检测胃蛋白酶原 I 及胃蛋白酶原 Ⅱ的荧光免疫层析法试纸条 ，并使用酶联免疫法试剂进行比对 ，对方法的线性、精密度、最低检 出限、回收 率、相关性等方面进行分析。结果 荧光免疫层析法检测胃蛋 白酶原 I及 胃蛋白酶原 Ⅱ，进行 Logistic曲线四参数拟合 ， R均为0．99，拟合度较高；精密性 CV分别为3．59％、3．40％；荧光免疫层析法与酶联免疫法的相关性较好 (PGI和PGI1 分别为 r=0．99，r=0．99)；最低检出限分别为0．81rig／mL和0．72ng／mL。结论 所建立的在一个检测条上同时测定 胃蛋 白酶原 I(PGI)及 胃蛋白酶原 Ⅱ(PGII)含量的荧光免疫层析法方法，具有较好的特异性和较高的灵敏度，PGI和PGI1 无相互干扰 ，结果准确、操作便捷，便于我国基层疾控中心及医疗结构对 胃蛋 白酶原的检测。 ． 关键词：胃癌； 胃蛋白酶原 ； 荧光免疫层析 DevelopmentofPepsinogen ImmunityChromatographyAssay UsingFluorescenceLanthanideNanoparticles JIANG Xin ，KANG Xi．Xiong ，LYU Chuan—Chen ，WANG Wen—yan。 (1·ClinicalLab。rat。ry，BeingTiantanH。spitalAmliatedt0m。capialu“iefiIy。fMedi。alSciences,B。ijinglooO5O，chi“； , 2．BioneovanCO．，LTD，Bering102600，China；3．AcupunctureandmoxibustionhospitalofCACMS，Beijing100700，China) Abstract：ObjectiveTodevelopalateralflowimmunechromatographyassayusingfluorescencetodetectthe quantityofpepsinogen I andpepsinogenIIinserum respectively，whichcanbeusedinthediagnosisof earlygastriccancer．MethodsAlateral—flow(LF)deviceusinghteluminescentlanhtanidenanoparti