植物乳杆菌Lp-2分批发酵工艺的研究 Study on Batch Fermentation Technology of Lactobacillus plantarum Lp-2.pdfVIP

植物乳杆菌Lp一2分批发酵工艺的研究+ 张广敏h2，王炜h3，包慧芳1’3，张晓琳h2，崔卫东1’3，詹发强1’3，林瑞峰3 1(新疆农业科学院微生物应用研究所。新疆乌鲁木齐．830091) 2(石河子大学农业生物技术重点实验室，新疆石河子。832003) 3(新疆特殊环境微生物工程技术研究中心，新疆乌鲁木齐，830091) 摘要 研究和发酵条件对植物乳杆菌I，p-2高密度增殖的影响．经过对缓冲盐法和化学中和法对比。确定了 植物乳杆菌高密度增殖发酵最佳方法为化学中和法并对其进行了详尽地研究。最后．进行了培养工艺的放大。 试验表明，在32℃、100r／min的培养条件下在3t发酵罐培养9．6h．所得菌体的最大产量为9．3×109cfu／mI．。 关键词 缓冲盐。流加碱中和，高浓度细胞悬浮液 植物乳杆菌可以产生有机酸、细菌素、过氧化氢、 乳杆菌的摇瓶发酵条件，通过对缓冲盐法和化学中和 双乙酞等多种天然抑菌物质，具有维持肠道内菌群平 法的对比，确定了植物乳杆菌的培养方式。同时对化 衡。提高机体免疫力，促进营养物质吸收等多种功 学中和法发酵植物乳杆菌的发酵工艺进行了详尽的 能…。在食品和饲料中添加植物乳杆菌菌剂，不仪可 研究，并对其发酵特征进行了研究分析。最后，以发 以改善人与动物肠道生态，还呵以用于食品与饲料的 酵特征为指导进行了3t罐中试试验。结果表明，此 防腐，是目前公认的一类具有潜在开发价值的天然生 x109 工艺生产的植物乳杆菌活菌数达到9．3 cfu／ 物性防腐剂。 mL，可为植物乳杆菌发酵剂制备基础发酵液。 植物乳杆菌消化系统进化比较原始。对碳氮源要 1 材料与方法 求比较苛刻，大量培养增殖植物乳杆菌比其他细菌相 对困难，因此，制备植物乳杆菌发酵剂的关键是对其 1．1 材料 进行高浓度培养。 1．1．1茵种 目前围内外大致采用如下几种培养方法对乳酸 植物季L杆菌(LZ口c￡06口ciZZHspZ口n￡口rMm)Lp一2由 菌进行高密度增殖发酵：(1)物理法：由常规传统方法 本实验室保存。 制得发酵液，经离心使菌体浓缩。此法会对菌体造成 1-1-2主要仪器设备 一定损害．降低发酵剂保存期内的存活率，因此生产 上应用较少。(2)化学中和法：利用中和剂控制培养 过程的pH值，以解除乳酸对菌体生长的抑制作用。 人单面净化工作台(苏州净化)，ML孓3020高压蒸汽 (3)缓冲盐法：通过添加大量的缓冲盐来控制发酵液 灭菌锅(新德医疗器械有限公司)，loL贝朗罐(德国 中的pH值。(4)渗析法：利用膜技术去除发酵液中 贝朗公司)，pH孓3C酸度计(上海雷磁仪器厂)， 抑制菌体生长的代谢产物，从而实现菌体高密度发 酵。此法得到的菌体浓度比前述几种方法要高，但是 多次过滤耗能大，对超滤膜材料的要求比较严格，在 平(日本岛津自动化设备有限公司)。 培养过程中易感染噬菌体，因此应用并不广泛f2~6】。 1．1．3培养基 本文在优化了发酵培养基的基础上。研究了植物