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量子点:FRET的新发展3刘玲芝刘志洪何治柯蔡汝秀(武汉大学化学与分子科学学院武汉430072)摘要荧光共振能量转移(FRET)技术作为一种高效的光学“分子尺”,在生物大分子相互作用、免疫分析、核酸检测等方面有广泛的应用。但是许多有机染料吸收光谱较窄而发射光谱较宽,并且光漂白现象比较严重,使得FRET的应用受到了限制,因此迫切需要寻找新的能量供2受体对。由于量子点(QDs)相对于有机染料有很多优点,可以较好地应用于FRET,可能成为FRET领域发展的一个有意义的新方向,近来已引起了人们的关注。本文就FRET的原理以及量子点应用于FRET的最新进展情况做了评述。关键词荧光共振能量转移量子点生物大分子中图分类号:O65713文献标识码:A文章编号(2006)02Π320337207QuantumDots:TheNewDevelopmentofFRET3LiuLingzhiLiuZhihongHeZhikeCaiRuxiu(CollegeofChemistryandMolecularSciences,WuhanUniversity,Whuhan430072,China)AbstractFluorescenceresonanceenergytransfer(FRET)hasbroadapplicationsinthestudyoftheinteractionsofbiologicalmacromolecules,immunoassay,nucleicaciddetectionandsoon.HowevermanyorganicdyesconventionallyusedinFREThavefunctionallimitationssuchaslowresistancetophotobleaching,narrowexcitationbandscoupledwithbroademissionbands,allofwhichhavelimitedthedevelopmentandtheapplicationofFRET.Thereforenewpairsofenergydonorandacceptorareneeded.Becauseoftheadvantagesoverorganicdyes,quantumdots(QDs)haveexpandedtherangeofFRETandhavebeenconsideredasnewandsignificantdevelopmenttrendofFRETnowadays.ThetheoryofFRETandtheapplicationsofQDsinFRETarereviewedinthisarticle.Keywordsfluorescenceresonanceenergytransfer;quantumdots;biologicalmacromoleculesFRET作为一种极为有效的光学分子尺不断地发展和完善,出现了一些新的技术和方法,如荧光共振能量转移显微术6、FRET2SNOM7、时间分辨荧光共振能量转移(TR2FRET)8等。本文就FRET的原理、应用、局限以及量子点应用于FRET的最新进展情况做了较全面的评述。1引言荧光共振能量转移(fluorescenceresonanceenergytransfer,FRET),是由F?rster1于1948年首先提出的,因此又可称之为F?rster能量转移。1967年,Stryer及Haugland2用实验证实了F?rster的预见,即能量转移效率与供、受体间距离的6次方成反比,并提出能量转移可以作为光度尺,用来测量110—610nm之间的距离。1978年,Stryer3在一篇综述里详细地说明了FRET在分析蛋白质结构中的广泛应用。随后,Lakowicz4、vanderMeer等5分别对FRET理论进行了全面而清晰的描述。诞生50多年以来,2FRET的原理一对合适的物质构成一个能量供体(donor)和能量受体(acceptor)对,能量受体可以是荧光物质也可以是只有吸收光而无发射光的荧光猝灭剂。当两者相隔110—1010nm,并且供体的发射光谱与受体收稿:2005年1月,收修改稿:2005年5月33通讯联系人e2mail:zhhliu.whu@163.com化学进展·338·第18卷的吸收光谱能有效地重叠,以供体的激发光激发,供体分子由基态跃迁到激发态之后,由于偶极2偶极相互作用,供体分子激发态能量hν就有可能以非辐射的形式有效地被传递至受体分子,而后受体分子通过发射出光子而弛豫,这就是荧光共振能量转移理寿命;相应地,FD、τD为没有受体存在时,供体的荧光强度和荧光寿命。利用F?rster半径R0和实验测得的能量传递效率