盐分和水分胁迫对芦荟幼苗叶片相对含水量.docVIP

盐分和水分胁迫对芦荟幼苗叶片相对含水量.doc

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盐分和水分胁迫对芦荟幼苗叶片相对含水量

钙的作用: 钙多存在于较成熟的营养器官中,不能自由移动。它参与细胞壁组成,促进原生质的脱水作用而增加粘性,中和代谢中产生的有机酸,避免其过多造成危害。钙还能减轻或避免K+、Na+、H+、Mn2+、Fe2+、Al3+等离子过多时对植物的毒害,这称为离子拮抗作用。植物对土壤含钙量的适应能力有很大差别,对此可区分为:1)极端钙生(Calcicaly)植物——只分布在富含碳酸钙的基质上;2)喜钙植物(Calciphile)——在多钙土壤上才生长正常,如落叶松、苜蓿等;3)嫌钙植物(Calciphobe)——土中含钙稍多即受害,如泥炭藓、石南类等;4)中间型——对土壤含钙量多寡没有明显反应。但许多研究表明,植物对钙的需求远非直觉那样简单。极端喜钙植物由于生长迟缓,在肥沃土壤条件下难以和别的植物竞争,而仅在贫瘠干燥的石灰岩与白垩上保存下来。另一些喜钙植物体内含钙并不一定很多,所“喜”的实是土壤由钙调节的良好结构和中性环境。嫌钙植物相反,仅适生于较低pH环境,有人认为有效铁的供应对它影响最大,所以在大不列颠多雨的石灰岩上,局部渍水使铁还原为亚铁就可以满足嫌钙植物所需,使它正常存活并出现与喜钙植物相伴分布现象。   植物对矿质元素的利用效率,很大程度上取决于土壤酸度。土壤微生物对此尤为敏感。 1.过氧化氢酶(CAT)活性测定 提取一定量的酶液,向其中加入过量的H2O2,过量的H2O2可用过量的KI来滴定,以钼酸铵为催化剂,产生的紫红色I2可与Na2S2O3反应生成无色的NaI: 2H2 O2 2 H2O+ O2 H2 O2+2KI+H2SO4 I2+K2SO4+H2O I2+ 2Na2S2O3 2NaI+ Na2S4O6 根据空白和样品滴定值之差,即可求出酶液分解的H2O2的量,以此衡量酶活性的大小: 过氧化氢酶活性(H2O2 mg·g-1FW·min-1)= (3-1) 其中,A-空白滴定值(ml);B-样品滴定值(ml);C-Na2S2O3浓度(mol·L-1);a-测定时酶液用量(ml);V-酶液总体积(ml);W-样品重(g);t-反应时间(min);17-1/2的H2O2摩尔质量(g ·mol -1)。 2.丙二醛(MDA)含量的测定 将硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热可与组织提取液中的丙二醛反应,产物为红棕色,在532nm和600nm波长下分别有最大和最小吸收峰。因此可利用比色法测定丙二醛的含量: MDA含量(μmol·g-1)= (3-2) 其中,A-反应液总量(ml);V-提取液总量(ml);a-测定用提取液量(ml);W-样品重(g);1.55×10-1-丙二醛微摩尔消光系数;d-比色杯光径长(cm) 注意:在有大量物质(主要为可溶性糖类)存在的情况下,MDA含量升高幅度很小甚至不再升高,所以不能再用设定的吸收波长来计算MDA含量。而且,由于糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm,但在532nm处也有吸收,因此测定植物组织MDA含量时一定要排除可溶性糖的干扰。一般认为用C=6.45(A532-A600)-0.56A450来衡量植物组织中膜脂过氧化水平还是比较可靠的。此外,低浓度铁离子能够显著增加TBA与MDA或糖的显色反应物在532、450nm处的吸光度值,因此在显色反应中需加一定量的铁离子。 3、游离脯氨酸含量的测定 现在一般使用的方法是磺基水杨酸快速测定法。用磺基水杨酸提取植物样品时,脯氨酸能特异性地游离于磺基水杨酸中,其他氨基酸则不能。在酸性条件下,脯氨酸与茚三酮反应生成稳定的红色缩合物;用甲苯萃取后,此缩合物全部转移到甲苯中,因此甲苯中色素的深浅表示脯氨酸含量的高低。此缩合物在波长520nm处有最大吸收峰,脯氨酸浓度的高低在一定范围内与其消光度成正比。 依据测得的消光度从标准曲线中查出测定液中脯氨酸浓度,按下式计算样品中脯氨酸含量,或者直接带入回归方程进行计算: 脯氨酸含量 (μg·g-1)=(C×V)/W (3-3) 其中,C-提取液中脯氨酸浓度 (μg·ml-1),由标准曲线求得;V-提取液总体积(ml); W-样品重(g)。 采用磺基水杨酸提取植物体内的游离脯氨酸,不仅大大减少了其他氨基酸的干扰,快速简便,而且不受样品状态(干样或鲜样)的限制。 三、研究举例 1.盐分胁迫对沟叶结缕草体内MDA含量和CAT活性的影响(周兴元等,2005) 全世界的盐渍化土地面积约占陆地面积的1/ 3,土壤盐渍化严重影响农业生产和生态环境。我国干旱区降水少、气候干燥,加上不合理的灌溉,形成了大面积的盐渍土,且有逐年增加的

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